【摘 要】
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本文研究建立了一种同时检测对虾桃拉病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)及传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的二温式多重RT-PCR技术.根据基因库中TSV、WSSV和IHHNV的基因
【机 构】
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广西壮族自治区兽医研究所,南宁,530001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会
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本文研究建立了一种同时检测对虾桃拉病毒(TSV)、白斑综合征病毒(WSSV)及传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)的二温式多重RT-PCR技术.根据基因库中TSV、WSSV和IHHNV的基因序列,分别设计了三对特异性引物,对同一样品中的TSVRNA、WSSV和IHHNVDNA模板进行二温式多重RT-PCR扩增,结果均同时得到了三条大小与实验设计相符的231bp(TSV)、593bp(WSSV)和356bp(IHHNV)特异性多重RT-PCR扩增带,而对其他对虾疾病病原核酸的PCR扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重RT-PCR技术最低能检测到TSVRNA10pg、WSSV和IHHNVDNA各100pg.用该多重RT-PCR对临床病料进行检测,结果显示了TSV、WSSV和IHHNV在我国南方的养殖对虾中广泛存在,本文建立的多重RT-PCR技术适用于TSV、WSSV和IHHNV这三种病毒的临床快速检测和鉴别诊断。
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