食气产溶剂梭菌的遗传改造与发酵优化

来源 :2016年工业生物过程优化与控制研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youkangstrong
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  一碳气体(CO、CO2和CH4等)是重要的碳资源.其来源广泛,包括大型石化、冶炼企业的废气,由含碳物质如煤、石油、天然气以及生物质等气化制备的合成气.近年来钢厂高炉煤气,转炉煤气,合成气等主要成分为一氧化碳,二氧化碳或甲烷的含碳气体发酵技术引入关注.构建能够高效利用含碳气体的人工细胞工厂,实现将其生物转化为石油基化学品,将为解决全球资源和能源问题开辟一条新路,对工业可持续发展具有重大意义.我们选择两种重要食气梭菌一扬氏梭菌(C.ljungdahlii)和食一氧化碳梭菌(C.carboxidivorans)展开了系统研究.首先建立了高效的分子工具箱,实现以TargeTron和CRISPR-Cas9技术对基因组的高效编辑,以及以mariner转座子技术对基因组的随机突变以筛选优势表型突变株.以此为基础,通过遗传改造和途径重构,提升了食气梭菌的性能,实现了一系列新产物(丁酸、正丁醇、异丙醇)的合成.同时,通过探索培养基成分和发酵条件优化,进一步提升了菌株的气体发酵能力,在CO和CO2混合气的发酵中,主要产物—有机酸和有机醇的总产量达到6.8 g/L,较原有发酵水平提升一倍以上.
其他文献
马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)广泛存在于酸奶、水果、酸乳酒等环境中,是食品安全级酵母,在一个多世纪前被分离获得。马克斯克鲁维酵母像酿酒酵母一样,出芽繁殖。但在进化过程中,两者在大约1亿年就在酵母科内分道扬镳,马克斯克鲁维酵母位于克鲁维属,酿酒酵母位于酵母属。本研究通过对马克斯克鲁维酵母的基因组解析以及比较功能基因组分析,从进化的角度研究了马克斯克鲁维酵母生长旺盛
会议
水通道蛋白具有水过滤专一性强、渗透性高,对蛋白酶具有抗性,在高效水处理多个领域有引入关注的应用。本论文综述了本课题组在水通道蛋白质的体内外表达和分离纯化方面的研究工作,以及对各种不同来源或修饰的水通道蛋白质生物活性的比较研究。最后采用静电吸附、层层自组装的方法制备嵌入水通道蛋白质的仿生膜,并采用截留反渗透装置分析仿生膜的水通量和盐截留率,充分展示了水通道仿生膜在高效过滤水方向的发展前景。
生物量是反映生物发酵过程进展的重要参数,对生物量进行实时监测可用于对发酵过程的调控优化。为克服现今主要采用的非原位离线方法检测生物量时间滞后和人为误差较大等缺点,本文针对1,3-丙二醇发酵过程设计了一个基于FT-NIR在线近红外光谱分析技术的生物量在线监测实验平台,通过对实时采集光谱的预处理以及敏感光谱段分析,应用偏最小二乘算法,建立了1,3-丙二醇发酵过程生物量变化的动态预测模型。通过实验测试,
会议
本报告分为三部分,一是通过对现有工业上广泛使用的有机氮源组分进行深入剖析,揭示了有机氮源的复杂性及其与发酵稳定性的关联关系;二是列举了四个发酵领域的实例,进一步阐释有机氮源在微生物实验研究及工业规模发酵中的重要作用。在利用基因工程菌发酵生产酶制剂过程中(以酮基还原酶和卤醇脱卤酶的表达为例),氮源的选择,特别是有机氮源的选择及不同有机氮源的合理搭配使用对生物量的控制和酶量表达尤为关键;在利用放线菌发
会议
酵母分批补料培养中,碳源添加过量会导致副产物乙醇的大量积累,破坏细胞结构及功能,降低碳源利用效率;碳源添加不足会限制细胞生长。为解决这一矛盾,提出了一种基于差分进化算法(Differential evlolution algorithm,DE)的在线自适应底物流加策略(DE-PID)。该策略以传统比例-积分-微分(Proportional-Integral-Differential,PID)控制为
会议
本研究针对没有发酵生产丙酮的专用菌种、丙酮基本依靠化石原料生产的问题,提出了一种可以提高和自由控制丙丁梭菌ABE发酵丙酮浓度与丙酮/丁醇比的方法.1)在玉米培养基调制过程中、通过控制糖化酶用量调节培养基初始葡萄糖浓度,使得发酵进入到产溶剂期后,残留葡萄糖浓度降至接近于0 g/L的低水平;2)在葡萄糖受限的条件下、丙丁梭菌的糖化酶合成分泌能力得到诱导,通过持续不断地分泌糖化酶、分解寡糖,可将葡萄糖维
会议
高质量的基因组网络模型的构建是菌株设计和纵向组学整合的重要基础,大量组学数据的涌现为基因组网络模型的构建和升级提供了必要的基础条件.在2008年发表的黑曲霉基因组网络模型iMA871基础上,我们根据最新的黑曲霉基因组组学注释结果和生理学实验数据对其进行升级,建立了新模型iHL1210.在原有模型基础上我们大幅增加了维生素和辅因子的胞内合成途径.升级后的模型中反应总数由1380个提升到1771个,独
Surfactin, a lipopeptide biosurfactant produced by Bacillus strains, is one of the most surface-active biosurfactants, which has potential to enhance oil recovery or environmental remediation [1].Howe
乙醇是全球产量最多的生物制品,纤维素乙醇是中国能源重要发展方向.本实验室应用基因工程技术,构建了在无氨基酸无维生素条件下能高效发酵生产乙醇的运动发酵单胞菌.细菌能高效利用单一的木糖、阿拉伯糖、甘露糖或葡萄糖、以及4种糖的任意组合,能利用乙酸为单一碳源生长、同时生产乙醇;绝大多数微生物在4 g/L糠醛中不能生长,在含4g/L糠醛而无氨基酸无维生素的培养基中,重组细菌的乙醇理论产率高达98%,在12
会议
以粗甘油为底物,采用自然富集驯化法经20次传代从厌氧活性污泥中获得一组微生物菌群C2-2M,可高效转化粗甘油为1,3-丙二醇(1,3-PD),转化率为0.71mol/mol,同时乳酸随传代逐渐降低直至消失.经16s rRNA基因检测,菌群C2-2M以丁酸梭菌为绝对优势菌(97.34%),还含双酶梭菌(0.81%)、谷糠乳杆菌(0.01%)及未鉴定梭菌属(1.82%).该菌群的间歇发酵可耐受100