解脲脲原体和微小脲原体生长特性的研究

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目的:探讨解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum.Uu)和微小脲原体(Ureaplasma Parvum,Up) 生长特性。方法:选取同济大学附属同济医院2007年8月到12月日常妇科门诊的病例266例。取其宫颈分泌物标本进行解脲支原体的培养,并对其中的142例阳性标本应用 PCR 技术分析.基因测序,筛选出测序与标准株(ATCC700970)相同的 Up 菌株.同时取 Uu 标准株 T960(CX8=ATCC27618)各传一代后进行液体培养。Uu 前4次每隔2h 看液体培养基颜色变化。测 PH 值,并取10ul 液体培养基滴种在固体培养基上,记数菌落,观察菌落大小。后5到8次改为每1 h 一次.从第9次开始又延长为2h 一次.共12次。Up 为每2h 一次,操作步骤同前,共16次。根据菌落数绘制出 Uu 和 Up 的不同生长曲线图。结果:(1)临床患者 Up 的感染率为90%,Uu 的感染率为5.6%。(2)Uu 的生长周期为22h,Up 的生长周期为30h,Uu 比 Up 的生长过程快8h。其中迟缓期比 Up 快5h.对数生长期比 Up 快2h.稳定期比 Up 快1 h,衰退期 Uu 和 Up 相同均为8h。Uu1/2的对数生长期在接种入液体培养基后12h.Up1/2的对数生长期在接种入液体培养基后18h。 (3)Uu 液体培养基 PH 值的变化速度快于 Up,Uu 在接种入液体培养基13h 后 PH 值达到7.5.此后数值一直保持不变。此点对应的是 Uu 对数生长期同时也是菌量繁殖的最高点。Up 在接种入液体培养基20h 后 PH 值达到7.5,此后数值也一直保持不变,此点也处于 Up 的对数生长期,也是 Up 菌量繁殖的最高点。(4) Up 和 Uu 在固体培养基上表现为棕色菌落。大小可分为大(直径25~50um).中(直径10~24um).小(直径 2~9um)三型,且 Up 大菌落数量多于 Uu。结论:(1)临床患者中 Up 感染率高于 Uu.液体培养中 Up 的生长周期长于 Uu,固体培养基上两者菌落形态有差异.这进一步证实了 Up 和 Uu 是两个不同的种。(2)Uu 和 Up 的临床分离以固体培养为好,培养30h 左右,在显微镜下看到菌落为准。液体培养基可用于传代和保种。连续传代时间 Uu 在12h 左右,而 Up 在18h 左右.即12对数生长期最好。
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