以短肽K237为配体的靶向脂质体超声造影剂的构建方法学

来源 :1st International Symposium on Ultrasound Molecular Imaging | 被引量 : 0次 | 上传用户:sdfcasdvgase
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  目的 以肿瘤血管内皮细胞特异性受体KDR为靶点,将与KDR有高度结合活性的十二肽K237与脂质体微泡偶联,构建靶向微泡(MBK237),筛选最佳适配剂量,鉴定其靶向性.方法 采用生物素-亲和素桥接法构建MBK237,流式细胞术筛选最佳适配剂量,光镜及荧光显微镜观察MBK237与与KDR阳性表达的LOVO细胞及KDR阴性表达的LS174T细胞结合情况.结果 不同亲和素剂量下(0,2、6、10、30 μg),微泡表面亲和素携带率有统计学差异(P<0.05),当Mavidin=6 μg时,携带率增长达平台期;不同K237剂量下(0、30、40、50、60、70、100 μg),微泡表面K237携带率有统计学差异(P<0.05),当MK237=50 μg时,微泡表面肽K237携带率增长达平台期.KDR强阳性表达的LOVO细胞周围可见大量MBK237黏附,荧光显微镜下微泡发出明亮绿色荧光,MBK237.KDR阴性表达的LS174T细胞周围无明显MBK237黏附,荧光显微镜下微泡荧光微弱,荧光强度0~1级,两组比较有显著差异.(P<0.05).结论 生物素-亲和素桥接法能有效构建携肽K237的靶向微泡,当加入Mavidin=6 μg,MK237=50 μg时,微泡表面配体携带率达到饱和,此剂量组合最优化,构建的MBK237,具有靶向特异性.
其他文献
目的 制备携载雄激素受体(AR)的siRNA的纳米级微泡,研究和探讨其联合超声辐照在体外抑制AR表达和对雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)细胞的生长抑制作用.方法 应用多聚赖氨酸法和静电吸附法在纳米级脂质微泡的基础上制备携载AR siRNA的纳米级微泡,分析其物理特性和体内显像效果.同时联合超声辐照,以人前列腺癌细胞(LNCap、C4-2和PC-3,其中C4-2为AIPC细胞,LNCap为雄激素依
目的 采用三步法实现自制生物素化液态氟碳纳米脂质微球与TNF-α损伤后大鼠心肌细胞的间接靶向结合;制备抗ICAM-1靶向液态氟碳脂质微球,检测其理化性质及抗体的耦联情况,并实现其与损伤后心肌细胞的直接靶向结合。方法 将体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞分为TNF-α损伤组(200 ng/ml)和非损伤组,均先后加入生物素化的抗ICAM-1抗体、链酶亲和素、生物素化荧光标记的液态氟碳脂质微球后,观察微球与心
会议
目的 在高强度聚焦超声消融对兔VX2乳腺肿瘤的过程中,加入纳米微泡,研究其对辐照效果的影响.方法 制备纳米微泡,检测微泡性质.VX2乳腺肿瘤兔随机分组,在不同辐照剂量(150W、120W),不同辐照时间(5s、3s)条件下,记录HIFU辐照前后灰阶变化,辐照后行病理检查,统计分析.结果 成功制备纳米微泡,平均直径498.9 nm.HE染色显示,HIFU+纳米微泡组较HIFU+PBS组,其靶区凝固性
目的 探讨超声辐照对Kupffer细胞内外Sonazoid微泡运动和形态的影响.方法 分离大鼠Kupffer细胞,倒置相差显微镜观测不同声压下微泡在细胞内外的动态现象.结果 Kupffer细胞对Sonazoid微泡吞噬率为91%.游离微泡在机械指数(Mechnical Index,MI)0.21时由静止出现震动,产生震动的最佳声压为0.21~0.44,微泡破裂的声压阈值是1.03.MI=l.18是
目的 制备一种新型多功能超声造影剂Fe3O4-PFOB纳米乳,并对其基本性质及体外显像效果进行检测.方法 采用薄膜-超声法将超顺磁性氧化铁(SPIO)Fe3O4纳米颗粒装载到全氟溴辛烷(PFOB)纳米乳的壳膜中,制备多功能超声造影剂Fe3O4-PFOB纳米乳.分别在光学显微镜、原子力显微镜及透射电子显微镜下观察造影剂的形态与结构;采用原子吸收分光光度计检测造影剂内的铁含量;用激光测径仪检测粒径大小
目的 探讨高强度聚焦超声(High intensity focused ultrasound,HIFU)治疗过程中,纹理分析对肿瘤凝固性坏死的判断,提高超声监控对凝固性坏死判断的灵敏度.方法 60只新西兰大白兔,左乳腺为造影剂组,右乳腺为非造影剂组.HIFU辐照在体兔VX2乳腺肿瘤,辐照强度80W,辐照时间均为3s.采集两组辐照前后声像图,通过小波变换提取声像图四个纹理参数作为参数A;另提取Tam
目的 超声造影剂的研究是决定超声分子影像学发展的关键因素之一.目前使用的微泡超声造影剂直径较大,在体内稳定性差,持续时间短.不幸的是,普通的纳米粒造影剂又存在超声显影效果差的缺陷.研究发现,液态氟碳纳米粒乳剂能增强多种医学影像显影.本研究拟选用一种特殊的液态氟碳制备一种纳米粒乳剂,能够在一定条件下相变产生微气泡增强超声显影,并通过实验研究其发生相变的作用因素.方法 先采用双步乳化法制备相变型液态氟
目的 探讨超声击破微泡造影剂这种新型的基因转染方法在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜组织中实现基因转染的可能性.方法 质粒的提取与鉴定:取大肠杆菌DH5α制备感受态细菌,将质粒pEGFP-C1转化感受态细菌,挑取单菌落接种到LB培养基中,37 ℃振荡培养过夜.提取质粒后酶切电泳鉴定.实验动物及分组:建立RA大鼠动物模型:大鼠四肢足爪均严重肿胀、踝关节直径增长幅度
会议
目的 探讨超声造影鉴别诊断胰腺囊实性病变的临床应用价值.方法 胰腺囊实性病变患者接受普通超声和超声造影检查,两位不同年资超声医师独立阅片,应用ROC曲线评估普通超声和超声造影判断胰腺囊实性病变良恶性的诊断价值,Kappa值评估不同年资超声医师之间的一致性.结果 52例患者共54个病灶,其中胰腺囊肿6个,胰腺假性囊肿19个,胰腺囊腺瘤9个,胰腺囊腺癌6个,胰腺导管内乳头状瘤3个,胰腺癌合并液化6个,
目的 探讨在低频超声辐照下,纳米微泡介导小干扰RNA(siRNA)在体外肿瘤细胞中的转染效能以及通过抗肿瘤凋亡相关基因的siRNA在诱导肿瘤凋亡中的应用.方法 ①利用采用薄膜-水化,声震法制备脂质微泡造影剂,并通过多次离心分离纯化最终得到纳米级微泡造影剂.利用聚合物(PEG-PL)将siRNA修饰成为带正电的胶束,再与带负电的微泡造影剂复合形成微泡-siRNA复合物.②利用动态光散射(DLS)法测