【摘 要】
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目的:本研究旨在拟通过构建定向敲除小鼠气道上皮细胞RUNX1敲除小鼠模型,探索RUNX1对小鼠肺发育的影响以及RUXN1在LPS诱导致急性肺损伤中的作用及其机制. 方法:利用SP-C/C
【机 构】
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四川大学华西医院再生医学研究中心心血管疾病研究室,成都610041
【出 处】
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2013中国生理学会心血管生理学术会议
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目的:本研究旨在拟通过构建定向敲除小鼠气道上皮细胞RUNX1敲除小鼠模型,探索RUNX1对小鼠肺发育的影响以及RUXN1在LPS诱导致急性肺损伤中的作用及其机制.
方法:利用SP-C/CRE/loxP重组系统在一定时间特异性地敲除小鼠肺气道上皮细胞RUNX1,采用荧光定量PCR技术、组织免疫化学技术检测肺组织中RUXN1的表达,用HE染色法观察胎肺形态学发育情况;同时在RUNX1定向敲除小鼠出生后8周通过气管滴注LPS诱导致急性肺损伤,观察小鼠的生存情况;采用ELISA和荧光定量PCR技术方法分别检测小鼠肺组织匀浆中炎症细胞因子IL-1β和TNF-α的蛋白、mRNA表达水平.
结果:1.与对照组相比，敲除组小鼠肺部RUNX1的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.05)，定向敲除小鼠气道上皮细胞中RLTNX1小鼠模型构建成功。2. HE染色结果提示定向敲除RL1NX 1基因可能不影响小鼠肺大体形态发育。3.定向敲除RUNX1后LPS诱导致急性肺损伤，小鼠死亡率显著高于对照组(P＜0.05)小鼠的生存能力明显降低。4.与对照组相比，敲除RUNX 1后LPS诱导致急性肺损伤，IL-β和TNF-α的mRNA及蛋白水平均显著增高(P＜0.05)。
结论:本实验成功构建了RLTNX1肺部定向基因敲除小鼠模型，证实特异性降低小鼠肺部RUNX1的表达基本不影响肺组织形态发育，但RUNX1可能在LPS诱导的急性肺损伤中具有重要作用，降低RI1NX1的表达可促进肺部炎症反应并降低小鼠生存能力。
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