[目的]与传统半导体量子点和有机染料相比,荧光碳点具有生物相容性好、光学性能优异和成本低廉等优势,在生物分析及生物传感领域应用越来越广泛。但碳点因缺少表面配体等原因导致其与抗体等生物识别材料的偶联效率较低。且裸露的碳点因粒径小,在标记过程中易发生聚集淬灭,也难以进行分离纯化。本研究拟合成绿色环保的碳点无机纳米复合物,提高碳点与抗体的偶联效率。通过构建新型的荧光免疫分析方法,以期实现牛奶中氯霉素的高灵敏、快速检测。[方法]以柠檬酸等为原料,通过水热法一步合成荧光碳点;通过荧光光谱,透射电镜等方式对其进行表征,确定碳点合成成功。通过配体辅助的自组装的方式,合成碳点-磷酸钙纳米复合物,并对其进行详细的表征测试。通过化学偶联和物理吸附的方式将氯霉素的抗体与碳点-磷酸钙纳米复合物进行偶联,构建荧光免疫探针,并评估两种方法的偶联效率。通过水热法合成氨基功能化的磁性纳米颗粒,并将其与氯霉素半抗原进行偶联,纯化。构建基于磁性纳米颗粒和荧光免疫探针的磁性荧光免疫分析方法,用于检测牛奶中的氯霉素残留。通过牛奶样本的添加回收实验来评价该方法的灵敏度和准确性。[结果]成功合成并鉴定了碳点-磷酸钙纳米复合物,其荧光性能良好,纳米分散性优异,水溶液中稳定性较好。实现了碳点-磷酸钙纳米复合物与抗体分子的有效偶联;成功构建了基于磁分离技术的氯霉素检测的磁性荧光免疫分析新方法。该方法的检测限(LOD)为0.03μg/kg;可在30min内完成检测,添加回收率74.3%-92.5%,变异系数小于11.3%。[结论]本研究合成的碳点磷酸钙纳米复合物不仅保留了碳点的优异荧光性能,且提高了碳点与抗体分子的偶联效率。基于磁性纳米颗粒和磁分离技术有效缩短了检测时间。建立的牛奶样本中氯霉素检测的磁性荧光免疫分析方法,实现了对氯霉素的高灵敏、快速检测。