ActiVinA和RA三步法诱导小鼠胚胎干细胞向胰腺β细胞的定向分化

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<正>诱导胚胎干细胞向胰腺β细胞的定向分化将为Ⅰ型糖尿病的细胞治疗提供了充足的细胞来源。目前,在体外诱导胚胎干细胞向胰腺β细胞分化的过程周期长并且操作复杂。我们采用了一种新的三步诱导方法,主要通过小分子如activin A,all-trans retinoic acid以及其他细胞因子来激活胰腺发育过程中关键的信号通路,从而可以在短期内能够诱导胚胎干细胞定向分化为功能性的胰腺β细胞:表达胰腺β细胞的标记基因如pdx1、insulin、glut2等,同时其胰岛素的分泌是可以受葡萄糖水平调控的。此外,胚胎干细胞经转染胰岛素启动子后接绿色荧光蛋白标记报告载体后采用同样诱导方法,诱导后的细胞表达绿色荧光蛋白,说明细胞中的胰岛素为正常表达,从而排除了可能吸收培养基中的胰岛素而导致的假阳性现象。此外,将诱导后得到的细胞移植到STZ诱导的糖尿病小鼠肾包囊下,病鼠的血糖有明显降低,病情有所好转。我们的方法为体外研究胰腺β细胞的发育机制提供了一个崭新的研究平台,同时为今后Ⅰ型糖尿病的细胞移植治疗提供了新的途径。
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