超支化糖原衍生物的合成和在293T和CNE2细胞基因转染中的研究

来源 :第六届全国组织工程与再生医学大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cattlecattle
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本课题利用多糖生物相容性好、易降解、无毒等有点,将以具有超支化结构的天然多糖-糖原为原料,合成一系列带胺基基团的超支化阳离子糖原衍生物,并在293T和CNE2细胞体系中研究它们的基因转染性能。本研究采用羰基二咪唑(CDI)活化法合成超支化糖原衍生物DMAPA-glc系列,通过红外光谱法(FTIR)检测和核磁共振氢谱分析检测其结构特征,测定其zeta电位在30左右,粒径大小为200nm左右。将DMAPA-glc与EGFP-NI质粒包裹组装形成纳米小球,分别转染293T细胞和CNE2细胞,用研究级倒置荧光显微镜观察GFP绿色荧光蛋白的表达情况,和流式细胞仪测定转染率,发现DMAPA组转染293T的转染率能达到80%,转染CNE2细胞能达到50%;基因转染效率较高,与阳性对照组PEI相当。用MTT,溶血实验等研究发现,DMAPA-glc组的细胞毒性大大低于同浓度的PEI, PEI在较低浓度就能引起红细胞的聚集粘附,干扰红细胞正常形态和功能,而MAPA-glc与红细胞共培养时显示出的生物相容性,具有较好的应用前景。
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