【摘 要】
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目的 研究蝙蝠葛活性成分体外对人白血病K562细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用，并探讨其作用机制.方法 应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对体外培养的人白血病K562细胞株的抑制
【机 构】
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延边大学医学院病理学与法医学教研部
【出 处】
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肿瘤多学科综合诊治新进展学术研讨会
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目的 研究蝙蝠葛活性成分体外对人白血病K562细胞株的抑制增殖和诱导凋亡作用，并探讨其作用机制.方法 应用MTT法检测蝙蝠葛活性成分对体外培养的人白血病K562细胞株的抑制增殖作用的影响及细胞毒活性；通过倒置显微镜、HE染色及透射电镜对K562细胞进行形态学观察；采用流式细胞仪检测K562细胞的周期分布相和细胞凋亡率；通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡关键效应酶Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的表达情况，深入探讨蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株诱导凋亡的机制.结果 (1) MTT比色法结果表明，蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株的增殖抑制作用呈剂量依赖性(P＜0.01)；(2)倒置显微镜观察：蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用后早期细胞出现凋亡形态学变化：细胞膜鼓泡、凋亡小体形成等；作用晚期细胞发生膜破裂坏死；(3) HE染色：蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用细胞后出现典型凋亡形态变化凋亡小体形成、细胞核浓缩呈蓝黑色、胞浆呈淡红色等，核染色质浓缩、呈碎块状；(4)透射电镜观察结果：蝙蝠葛活性成分20μg/ml作用细胞后出现核染色质致密浓缩或断裂，形成大小不等的凋亡小体；(5)流式细胞仪检测结果显示：蝙蝠葛活性成分可以诱导K562细胞发生凋亡，加药组出现亚二倍体峰，并且Go/G1期细胞比例显著增加(P＜0.01)，而S期和G2/M期细胞比例则明显下降，将细胞阻滞在Go/G1期；(6)免疫细胞化学结果表明：蝙蝠葛活性成分作用后加药组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3表达增加，与对照组相比较均有显著差异(P＜0.01).结论 (1)蝙蝠葛活性成分对人白血病K562细胞株具有抑制增殖和诱导凋亡作用.(2)蝙蝠葛活性成分对K562细胞抑制增殖作用在20μg/ml作用24 h之前主要以诱导凋亡为主.(3)蝙蝠葛活性成分诱导凋亡作用机制可能与细胞周期发生G0/G1期阻滞有关；并且通过上调Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3蛋白表达，经由细胞凋亡的死亡受体通路和线粒体通路完成凋亡的启动和执行.
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