【摘 要】
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目的:研究大黄提取物对SARS-CoV 3C-Like proteinase(严重急性呼吸系统综合症冠状病毒3C样蛋白酶,下文简称SARS-CoV 3CL蛋白酶)的抑制作用. 方法:干燥的掌叶大黄(Rheum pa
【机 构】
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桂林医学院药理教研室,广西桂林,541004
【出 处】
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第一届中泰传统医药和天然药物研究学术研讨会
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目的:研究大黄提取物对SARS-CoV 3C-Like proteinase(严重急性呼吸系统综合症冠状病毒3C样蛋白酶,下文简称SARS-CoV 3CL蛋白酶)的抑制作用.
方法:干燥的掌叶大黄(Rheum palmatum L.)经粉碎后采用石油醚、氯仿,乙酸乙酯,正丁醇,水渗漉,得到粗提物.从SARS冠状病毒中提取病毒RNA,通过RT-PCR,得到SARS-CoV 3CL蛋白酶基因,构建进表达载体,应用大肠杆菌表达系统,表达得到SARS-CoV 3CL蛋白酶,利用(NH4)2S04分级分离,阴离子交换层析纯化,得到有活性且高纯度的3CL蛋白酶.根据文献报道[1]合成能被3CL蛋白酶的底物TQ-6pNA,底物被3CL蛋白酶识别并切割后产生的pNA在405nm有光吸收,可被酶标仪定量检测.计算出大黄粗提物对SARS-CoV 3CL蛋白酶的抑制率(％Inhibition)和IC50值(酶活性被抑制到50％时抑制剂的浓度).
结论:大黄氯仿渗漉提取物对SARS-CoV 3CL蛋白酶有较高的抑制作用,有可能发展成为新的抗SARS病毒药物.
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