【摘 要】
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2013～2019年,对滕州市发生的马铃薯根结线虫进行了种类鉴定及田间危害症状、危害程度调查.根据形态特征鉴定为南方根结线虫.该线虫危害马铃薯在山东省为首次发现.盆栽试验和大田调查,南方根结线虫危害马铃薯后,根系形成大小不等的根结,根结表皮粗糙、溃烂、死亡;植株稍矮,上部姜蔫,下部叶片黄化,逐渐死亡;块茎皮孔下薯肉稍增生、膨大,似赖皮.该虫危害马铃薯在滕州地区呈逐年加重之势,对经济效益影响巨大.试
【机 构】
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滕州市农业农村局,山东枣庄277599 界河镇农技站,山东枣庄277521
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2013～2019年,对滕州市发生的马铃薯根结线虫进行了种类鉴定及田间危害症状、危害程度调查.根据形态特征鉴定为南方根结线虫.该线虫危害马铃薯在山东省为首次发现.盆栽试验和大田调查,南方根结线虫危害马铃薯后,根系形成大小不等的根结,根结表皮粗糙、溃烂、死亡;植株稍矮,上部姜蔫,下部叶片黄化,逐渐死亡;块茎皮孔下薯肉稍增生、膨大,似赖皮.该虫危害马铃薯在滕州地区呈逐年加重之势,对经济效益影响巨大.试验的相关研究,为滕州地区马铃薯根结线虫病的田间准确诊断和防治提供科学依据.
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采用交叉引物恒温扩增技术(Cross priming amplification,CPA)原理,根据PCV2的Cap基因设计一组交叉扩增引物,用构建的Cap基因重组质粒作为标准DNA模板,对反应体系的引物浓度、Betaine、MgSO4、dNTP、Bst酶、反应温度和时间进行优化,并结合核酸试纸条技术,建立一种简便、快速、准确的现场可视化检测PCV2的交叉引物恒温扩增检测方法(PCV2-CPA).
交叉引物扩增技术(CPA),是一种新型的利用恒温扩增进行基因检测的分子诊断技术.本研究确立了一种检测猪瘟病毒的CPA方法,并与常规的反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法在灵敏性和特异性方面做对较,结果表明该CPA方法特异性好,较常规RT-PCR灵敏性稍好,检测限为2.317×101copies/uL,操作简便,可用于临床现场的猪瘟病毒特异性检测.
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