论文部分内容阅读
目的阿尔茨海默病（AD）是一种进行性认知功能障碍和记忆损害的脑退行性疾病,目前尚缺乏有效的防治药物。新近研究表明,肠道菌群紊乱可能是影响AD认知功能受损的一个关键因素,是改善AD认知功能受损早期干预靶点。因此,以肠道菌群为出发点,探索安全、有效的AD早期防治措施至关重要。莲房原花青素（LSPC）,作为一种黄酮类物质,已被证实可改善老年小鼠的认知功能障碍,但其具体的作用机制尚不完全清楚。近十几年研究发现,黄酮类化合物也具有益生元作用,可调节肠道菌群。然而,目前国内外对有关黄酮类化合物,肠道菌群,AD三者关系的报道仍十分有限。本研究旨在探究并明确LSPC通过富集肠道益生菌缓解AD小鼠认知功能障碍及其作用机制,从而为AD防治提供新的理论依据。方法 （1）通过液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定LSPC在体内各组织器官中的分布,确定LSPC在体内代谢的主要功能成分:槲皮素-3-O-葡糖苷酸（Q-3-O-g）。（2）双侧侧脑室注射Aβ1-42建立C57BL/6J小鼠AD模型,给予Q-3-O-g灌胃干预后, Mirros水迷宫评价AD小鼠学习和记忆能力,处死并采集血液、海马、结肠、粪便等样本。（3）通过组织学及病理学等实验进行血液、结肠、海马炎性因子及Aβ聚集、Tau磷酸化的测定。同时,采用16S rRNA进行肠道菌群高通量测序分析。结果 （1）通过LC-MS/MS检测发现,LSPC组中各组织器官Q-3-O-g的含量明显增高。（2）Q-3-O-g改善AD小鼠空间学习记忆障碍。（3）Q-3-O-g降低AD小鼠海马中Aβ的聚集、Tau的磷酸化。（4）Q-3-O-g降低AD小鼠血液、结肠及海马促炎因子（TNF-α, IL-6, IL-1β）的表达。（5）16S rRNA结果显示AD组与Q-3-O-g组肠道微生物的结构存在明显差异。此外,Q-3-O-g可影响AD小鼠肠道菌群α多样性及β多样性变化。更重要的是,Q-3-O-g在抑制AD小鼠肠道内Proteobacteria等条件致病菌丰度的同时促进Akkermansia等有益生菌属的丰度。Spearman相关分析结果显示Akkermansia等益生菌与血液、结肠及海马组织中TNF-α, IL-6, IL-1β及Aβ聚集、Tau磷酸化成负相关,且与学习记忆障碍指标也成负相关。结论 LSPC通过选择性富集肠道益生菌改善Aβ1-42致AD模型小鼠认知功能障碍。