【摘 要】
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本文利用合成生物学方法,通过设计生物砖元件及生物系统来调控依赖两种辅酶的相应1,3-丙二醇氧化还原酶的表达,构建了编码基因分别为dhaT 基因和yqhD 基因的两类生物砖元
【出 处】
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第七届中国工业生物技术发展高峰论坛
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本文利用合成生物学方法,通过设计生物砖元件及生物系统来调控依赖两种辅酶的相应1,3-丙二醇氧化还原酶的表达,构建了编码基因分别为dhaT 基因和yqhD 基因的两类生物砖元件,可相应地表达依赖于NADH辅酶和NADPH辅酶的1,3-丙二醇氧化还原酶及其同工酶.在此基础上,研究了不同生物转元件的表达效率,并对1,3-丙二醇氧化还原酶最优培养条件.对诱导时间、诱导温度、IPTG用量进行考察,结果显示最优诱导条件为IPTG 0.1mM、30℃、150rpm诱导10h.与诱导前发酵条件下的酶活力相比,结果显示RBS1.0酶活力显著提高,粗酶活由52U／ml提高到211U／ml,比活由12.1U／mg提高到40.3U／mg,后者是前者的三倍多,高于现有文献报道.而其他RBS效率(RBS0.6、RBS0.3、RBS0.07)优化后也比优化前的酶活提高了2倍左右.据此,可进一步对辅酶并用的内在机制进行分析和建模,进而有利于构建出更优的1,3-丙二醇生物转化体系.
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