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自1991年Holland等率先提出一种利用双标记寡核苷酸杂交探针和DNA聚合酶的5端外切酶活性检测的PCR方法到1996年由美国AppliedBiosystems公司推出成熟的荧光定量PCR技术,该方法不断完善发展并以特异性强、精确定量、能有效解决了PCR易污染和避免一般PCR扩增平台问题,实时荧光定量PCR技术广泛应用于核酸定量等领域.本文探讨，1实时荧光定量PCR的原理，2实时荧光定量PCR技术的方法，3标准品的制备，4定量方法，5荧光定量PCR在病毒研究上的应用。