【摘 要】
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目的探究脊髓小胶质细胞组织蛋白酶S(Cathespin S,Cat S)在慢性功能性内脏痛中枢敏化中的作用及机制。方法通过新生期给予伤害性结直肠扩张刺激建立IBS模型大鼠,检测腹外斜肌
【机 构】
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疼痛研究实验室研究; 生理学和病理生理学; 福建医科大学; 福建神经胶质和疾病的省级重点实验室;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81471138);福建省自然科学基金(2018J01834);福建省科技创新联合基金(2018Y9069)
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目的探究脊髓小胶质细胞组织蛋白酶S(Cathespin S,Cat S)在慢性功能性内脏痛中枢敏化中的作用及机制。方法通过新生期给予伤害性结直肠扩张刺激建立IBS模型大鼠,检测腹外斜肌对结直肠扩张的放电幅值来评估大鼠是否有内脏痛觉敏化。观察鞘内注射P38MAPK的抑制剂(SB203580)及Cat S抑制剂(LY3000328)后大鼠内脏痛觉敏感性的变化。Western Blot检测IBS大鼠及对照大鼠脊髓胸腰及腰骶段Cat S的表达及给药前后相关蛋白表达量的变化。旷场试验检测LY3000328对IBS大鼠及对照大鼠自发运动和情绪的影响。免疫荧光检测IBS大鼠及对照大鼠的脊髓胸腰及腰骶段Cat S及趋化因子Fractalkine(FKN)/CX3CR1的表达量及分布情况。结果与正常对照大鼠组相比,新生期伤害性刺激可致成年IBS大鼠内脏痛觉敏感性显著增高(P<0.01);与正常对照大鼠组相比,IBS大鼠脊髓胸腰及腰骶段Cat S蛋白表达量较对照组大鼠显著升高(P<0.05);给SB203586后IBS大鼠腹外斜肌对40及60 mm Hg结直肠扩张压力的放电反应显著降低(P<0.01);给高浓度LY3000328后较注药前显著降低(P<0.01);给中浓度LY3000328后较注药前显著降低(P<0.05);给低浓度LY3000328后较注药前无显著差异;然而对照大鼠分别给予SB203580和高浓度LY3000328后在相同压力下腹外斜肌放电都没有显著差异;同时给药组与溶媒DMSO组跟给药前相比,给SB203580后IBS大鼠脊髓胸腰段及腰骶段Cat S的表达显著减少(P<0.05),给高浓度及中浓度LY3000328后IBS大鼠脊髓胸腰段及腰骶段FKN的表达显著减少(P<0.01)。旷场试验提示LY3000328对IBS大鼠及对照大鼠的自发运动功能和情绪无显著影响结论脊髓小胶质细胞Cat S参与慢性内脏痛中枢敏化的形成,其机制可能是通过裂解位于神经元上的趋化因子FKN,进而结合小胶质细胞上CX3CR1受体激活p38MAPK信号通路,介导慢性功能性内脏痛中枢敏化的形成。
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