Geobacillus POT-5高温淀粉酶α-amylase基因的克隆及表达

来源 :2006中国科协年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:vertra
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从高温环境中的土壤中分离到一株能在75℃生长并分泌高温α-淀粉酶的菌株,经16S rDNA核苷酸序列分析对此高温菌进行分类鉴定,初步鉴定为地热芽孢杆菌属,命名为Geobacillus POT-5.提取该菌的基因组DNA,通过PCR方法克隆了该菌α-淀粉酶的基因(amy),测序结果显示该基因全长1545bp,编码514个氨基酸,理论分子量约60.43KD.将基因amy克隆至原核表达载体pET-22b(+)上,通过转化大肠杆菌BL21得到了表达,表达产物具有淀粉酶活性.酶学性质分析表明其反应的最适pH为5.5,最适温度为62℃.
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