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[目的]研究环状脂肽bacaucin (杆农素)特异性抗金黄色葡萄球菌的作用机制,为筛选新型抗菌靶位点提供新思路。[方法]首先,采用亚抑菌浓度bacaucin连续诱导金黄色葡萄球菌的敏感菌株S.aureus ATCC29213,使之在低浓度药物压力下产生耐药突变体进而筛选bacaucin潜在抗菌靶点。随后,通过微量肉汤稀释法测定突变株对常用抗生素的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值,验证其是否与常用抗生素存在交叉耐药。其次,通过对敏感菌及两株耐药菌的全基因组测序,对所得全基因组序列进行单核苷酸突变位点(single nucleotide polymorphisms,SNP)分析。随后,通过结晶紫半定量分析敏感菌株和耐药菌株产生物膜能力的差异。最后,通过扫描电镜观察敏感菌株和耐药菌株的外部形态变化。[结果]在连续培养150天后获得对bacaucin最小抑菌浓度值分别升高4倍(R4)和64倍(R64)的耐药突变体。检测最小抑菌浓度发现敏感菌和两株耐药菌对羧苄青霉素,万古霉素以及达托霉素均敏感,无交叉耐药情况,表明bacaucin可能具有一种新的抗菌机制。分析全基因组数据发现高耐药菌株R64青霉素结合蛋白合成基因和fmtA基因发生突变。青霉素结合蛋白和FmtA蛋白都被报道与细菌细胞壁的合成有关,其中fmtA基因还与细菌生物膜的形成有关。通过结晶紫半定量分析发现耐药菌株R4产生生物膜的能力较敏感菌株S.aureus ATCC 29213提升了近10倍,而耐药菌株R64几乎不产生生物膜。最后,采用扫描电镜观察敏感菌和耐药菌的外部形态变化,发现敏感菌株和耐药菌株R4细菌表面保持光滑,耐药菌株R64细胞表面发生变化,出现许多絮状凸起。[结论]Bacaucin可能通过与青霉素结合蛋白以及FmtA蛋白结合,影响细菌细胞壁的合成,从而有效杀死细菌。FmtA尚未报道为有效的金黄色葡萄球菌的抗菌靶点,本实验提示可以筛选靶向FmtA蛋白的药物,从而有效拮抗金黄色葡萄球菌。