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近年来,狂犬病在中国西北及北部省份频繁发生,已成为狂犬病流行的另一特征.2013年,内蒙古呼和浩特市大青山野生动物园20余只黇鹿爆发狂犬病.采取发病鹿脑组织进行了直接免疫抗体法(DFA)及RT-PCR法对该病进行了诊断.取20％病鹿脑组织悬液进行了小鼠颅内接种(i.c.)分离病毒,并连续传6代,发现病毒在第4代即已"固定",将病毒命名为IMDRV-13.该病毒在MNA细胞及BSR细胞上的半数组织细胞感染量(TCID50)分别可达105.43和105.46,神经亲和指数为1.07.此外,该固定毒株在成年小鼠肌射(i.m.)攻毒的半数致死量(LD)为104.50,致病性指数为0.12,与之相比,标准攻毒毒株CVS-24的神经亲和指数为和致病性指数分别为1.23和0.13.随后,我们通过RT-PCR法,将IMDRV-13的基因组分9个连续重叠片段进行了克隆,通过5'RACE及3'RLM-RACE对基因组5'及3'末端序列进行了扩增,并拼接获得该毒株完整的基因组序列(GenBank登陆号为KJ564280),该基因组由11924个核苷酸组成,G+C含量为44.66％,与其他RABV毒株具有相似的基因组结构,与其他42株RABV基因组序列的一致性为80.4-99.5％,且与其他两株内蒙古分离株CNM1101C和CNM 1104D具有较高的序列一致性(均为99.0％).系统发育分析发现,IMDRV-13属于犬狂犬病毒,China-Ⅰ谱系.此外,该病毒株G蛋白上抗原位点Ⅲ的一个点突变I338T导致该位置增加了一个N-糖基化位点(N336),对病毒的致病力和宿主适应性具有潜在的影响.随着更多的狂犬病病毒株在内蒙古的发现,可以推测曾一度主要在南方流行的China-Ⅰ谱系病毒己开始向北扩散至中国的最北端,此外,多个谱系的狂犬病病毒在内蒙古流行,也增加了疫情流行的复杂性和控制的难度.