口蹄疫病毒非结构蛋白3A与牛源细胞互作蛋白的筛选

来源 :中国畜牧兽医学会生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanxu0214
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口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease virus.FMDV)引发的一种主要危害牛、羊、猪等偶蹄动物的急性、热性传染病.FMDV非结构蛋白3A与病毒复制、毒力和宿主嗜性密切相关.FMDV3A蛋白由153个氨基酸组成,而其他微RNA病毒3A蛋白由大约76个氨基酸组成,该蛋白N端和中间的跨膜区非常保守,而C端的氨基酸序列保守性较差,该蛋白的序列保守性可能影响其功能的发挥.本实验首先构建了牛舌细胞和牛甲状腺细胞的cDNA文库,并采用酵母双杂技术,以3A全长、3A、3A为诱饵,与牛甲状腺和牛舌细胞的cDNA文库进行双杂交,筛选获得一个与3A杂交的阳性克隆,继而通过RACE技术克隆全长基因。结果分析表明,该基因全长360个碱基,与SSNA1具有较高同源性。与3A互作的牛源细胞蛋白的筛选与全长基因的获得,为进一步阐明FMDV3A蛋白在病毒侵染细胞周期中的生物学功能奠定了基础。
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