安全性药理学的核心组合实验是研究受试物对中枢神经系统、心血管系统、呼吸系统的潜在影响,其中对中枢神经系统的研究是通过定性或定量评价给药后机体的运动功能、行为改变、协调功能、感觉/运动反射和体温等的变化。ICH S7A推荐安全性药理实验中采用FOB或者Irwin’s方法评价药物对中枢神经系统的影响。功能观察组合试验(Functional ObservationBattery,FOB)是由Irwin’s法优化发展而来,试验人员通过观察机体行为、感觉/反射等功能的改变,对相应的指标进行量化评分,评价药物对机体中枢和外周神经系统的影响。观察指标的设计一般采用20～50个观察指标,包括笼内观察、开放场观察、手持观察、操作性观察等。笼内观察指标包括饮水、进食、清醒、绕笼内运动、竖毛、发声、理毛、攻击同笼动物等,开放场观察指标包括体态、步态、自主运动、排尿、排便、皮肤颜色、刻板症、尾巴体位、兴奋、跳跃、流泪、抽搐、扭体症状等,手持观察指标包括抓握难易程度、身体张力、腹部张力、瞳孔反射、眼睑反射、突眼等,操作性观察指标包括翻正反射、声音反射、体位被动反应、夹尾反应、瞳孔反应、接触反应、逼近反应等。观察指标的先后顺序要考虑到试验操作对动物的胁迫大小,将胁迫性小的指标排在前面观察,胁迫性大的指标观察靠后。对各项观察指标要进行分值细化,一般设0～8分,对正常、异常状态的程度给予特定分值,对中间程度可酌情打分。观测时间一般包括给药前和给药后3～5个时间点,给药前的观察评价必不可少,通过给药前自然状态的观察可降低操作人员对状态判断的失误性。对所有动物同一个时间点的观测不能持续时间太久,若是动物数量太多,可酌情增加观测人员或分批次进行。为了减少主观因素在观察评价中的影响,参与FOB试验的观察人员都需要经过严格培训,持证上岗。观测者操作上要减少对动物的胁迫性,同时不同人员之间要加强经验交流,保证评分尺度的一致性。控制观测环境对于FOB试验的规范性和重复性同样重要,温度和光照条件必须保持不变,以避免对体温的干扰;试验前24 h内尽量不要换笼内垫料,垫料的改变会诱导动物探究行为的增加,会掩盖轻微兴奋的存在;观察完成的动物不要直接放回原笼中,以减少试验完成的动物对其他待观察动物的影响。完整的FOB试验指标可达60项,包含了一般体征、自主体征和精神方面,获取信息多、使用动物少、评价迅速、指标可量化等优点使其成为安全性药理试验的有力工具。国外已经有将FOB试验与其他的检测设备联合起来量化相关的指标的文献报道,如抓力、运动路程、最大运动速度、活动时间等指标。目前国内大部分GLP实验室对FOB检测指标较单一,完整体系的FOB观察组合试验不多见。FOB观察组合试验能够大大降低新药将来在临床应用中的神经系统副作用,如惊厥风险、镇静、共济失调、震颤等,尽早发现潜在毒性,提高研发效率,缩短研发周期,降低人力资源浪费。