目的:检测全国19家医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的TEM型ESBLs。 方法:收集2004~2005年全国19家医院对头孢他啶耐药的大肠埃希菌98株和肺炎克雷伯菌109株,琼脂稀释法测定菌株MICs,PCR扩增bla<,TEM>基因。扩增阳性菌株进行接合实验,测定接合子MICs并PCR扩增bla<,TEM>基因。扩增阳性的菌株和接合子以等电聚焦电泳(IEF)检测其β-内酰胺酶等电点。对具有典型TEM型ESBLs表型的菌株进行测序和变性高效液相色谱(DHPLC)分析。进一步收集检出突变的菌株宿主患者及其所在病房分离的对头孢他啶不敏感的菌株,进行测序、DHPLC分析,以及ERIC-PCR和RAPD分型。 结果:实验菌株中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBL阳性率分别为84.7％和68.8％,bla<,TEM>基因阳性率分别为67.3％和69.7％。初步收集的菌株中仅1株大肠埃希菌P34表达TEM-12型ESBL,其它均为TEM-1。P34宿主患者分离的21株大肠埃希菌中有18株表达TEM-12,且所有菌株均为同一克隆。该患者住院期间所在病房分离的11株对头孢他啶不敏感大肠埃希菌均表达TEM-1,与P34均不是同一克隆,但不同患者间存在菌株的水平传播。 结论:TEM型ESBLs已在中国出现,但仍非常罕见,不是导致菌株对头孢他啶耐药的主要原因。本研究在国内首次报道了TEM-12型ESBL,该菌株虽未引起流行,但仍应引重视。必须加强感染控制,防止TEM型ESBLs在中国的传播。