【摘 要】
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目的:建立异倍体小鼠胚胎干(mES)细胞系,研究异倍体对mES细胞功能特征的影响.方法:我们用转座子介导的基因组随机插入、Cre-loxP系统等遗传学操作方法富集某条或某几条染色体
【机 构】
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中国医学科学院/北京协和医学院基础医学研究所,北京,100005
【出 处】
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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会
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目的:建立异倍体小鼠胚胎干(mES)细胞系,研究异倍体对mES细胞功能特征的影响.方法:我们用转座子介导的基因组随机插入、Cre-loxP系统等遗传学操作方法富集某条或某几条染色体三体(Trisomy)的mES细胞株系.制备染色体中期分裂相,用染色体计数的方法初步分析细胞内染色体数目的变异.用G显带及染色体特异性的FISH在染色体水平进一步明确染色体数目的变异.再用CGH array在基因组范围内进行基因拷贝数的分析.随后,我们用碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色、RT-qPCR及Western Blot等方法分析了异倍体mES细胞的干细胞标记物的表达情况,用alamarBlue法测定了异倍体mES细胞的增殖活性,用流式细胞术分析了异倍体mES细胞的细胞周期,用克隆形成实验分析了异倍体mES细胞的克隆形成能力.
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