【摘 要】
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M.gallisepticum全基因组测序工作的顺利完成吸引了无数生命科学的研究者对其致病机理以及分子生物学方面进行深入研究。由于基因组的"衰减性"进化使得MG生物合成及代谢能力受到很大的限制,许多功能蛋白酶、膜相关蛋白、致病因子的分子结构都与别的原核生物存在许多差别,有的缺少典型的功能结构区域,有的只具备蛋白功能结构基序,有的甚至只含有与蛋白功能结构基序有一定同源性的结构,因此这给研究其编码基因
【机 构】
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中国农科院上海兽医研究所,上海,200232;扬州大学兽医学院,江苏扬州,225009 中国农科院
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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M.gallisepticum全基因组测序工作的顺利完成吸引了无数生命科学的研究者对其致病机理以及分子生物学方面进行深入研究。由于基因组的"衰减性"进化使得MG生物合成及代谢能力受到很大的限制,许多功能蛋白酶、膜相关蛋白、致病因子的分子结构都与别的原核生物存在许多差别,有的缺少典型的功能结构区域,有的只具备蛋白功能结构基序,有的甚至只含有与蛋白功能结构基序有一定同源性的结构,因此这给研究其编码基因的功能增加了难度。为了初步鉴定MGA0553基因的功能,制备特异性抗体是十分必要的。本研究利用MG-S6株作为对象,扩增与Rlow株MGA0553基因具有高度同源性的片段,并将获得的基因片段在E.coli BL21(DE3)上进行原核表达。结果发现,表达产物形成难溶的包涵体；以表达产物作为可溶性抗原,并采用切胶免疫的方式,免疫6周龄ICR小鼠,能够刺激机体产生特异性抗体；用Western-blot方法对细菌表达产物进行检测,结果表明:重组表达载体pET-32aMGA0553能够在E.coli BL21(DE3)上高效表达,且表达产物以难溶的包涵体形式存在。该特异性抗体的获得为初步研究MGA0553的功能奠定了基础。
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