【摘 要】
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以猪弓形虫核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列为模板自行设计引物,建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法,并优化出了PCR诊断猪弓形虫病的最佳反应条件.敏感性和特异性试验结果显示,该PCR方法能检测到的最低DNA量为0.001ng,且与相关的9种对照寄生虫、细菌和病毒无交叉反应;随机取两个临床样品的阳性PCR扩增片段进行克隆测序表明,二者序列与GenBank中已登录的猪弓形虫ITS1基因相应部
【机 构】
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河南省动物疫病预防控制中心,郑州,450011
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以猪弓形虫核糖体DNA第一内转录间隔区(ITS1)序列为模板自行设计引物,建立了猪弓形虫病特异PCR诊断方法,并优化出了PCR诊断猪弓形虫病的最佳反应条件.敏感性和特异性试验结果显示,该PCR方法能检测到的最低DNA量为0.001ng,且与相关的9种对照寄生虫、细菌和病毒无交叉反应;随机取两个临床样品的阳性PCR扩增片段进行克隆测序表明,二者序列与GenBank中已登录的猪弓形虫ITS1基因相应部分序列完全相同,证明所建立的PCR方法具有高度的敏感性和特异性.用建立的PCR诊断方法对临床30份猪弓形虫疑似病料和40份健康猪抗凝全血样品进行检测,结果30份病料中有24份呈现阳性;40份健康猪血中有4份为阳性;本研究为猪弓形虫病的快速诊断提供了一种新方法.
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