【摘 要】
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Kras基因是人类肿瘤基因中重要的一员.研究表明,当此基因启动子区富G序列形成G-四链体时,Kras基因的转录表达水平会发生下降,从而抑制细胞的增殖与生长[1].本课题以Kras
【机 构】
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北京大学化学与分子工程学院,北京市海淀区成府路202号,100871
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Kras基因是人类肿瘤基因中重要的一员.研究表明,当此基因启动子区富G序列形成G-四链体时,Kras基因的转录表达水平会发生下降,从而抑制细胞的增殖与生长[1].本课题以Kras启动子区野生型序列S1：[(G3A2GA)2G5AG2]和突变体序列M1：[(G3A2TA)2G3T2AG2]为靶点,采用电喷雾质谱(ESI-MS)、圆二光谱(CD)相结合的方法探索了Kras基因G-四链体的形成以及结构特点.ESI-MS/MS中,[S1+2NH4+]5-峰碎裂时,仅丢失碱基(Fig.1A),说明NH4+稳定的嵌入到G-四分体层间；结合CD谱图(Fig.1C),说明S1形成了平行三层G-四链体结构.而突变体M1的ESI-MS图中结合1个NH4+为基峰(Fig.1B),且CD吸收峰发生蓝移,说明G-四链体结构向反平行构象转化(Fig.1C)[2].CD升温实验中,突变后G-四链体Tm值减小13℃,表明G-四链体稳定性有显著下降.本研究证实了Kras基因启动子序列G-四链体的形成,并发现突变会引起G-四链体的构象、稳定性发生明显变化,这一结果将为Kras启动子区G-四链体结构的探索及其生物学功能研究提供重要的线索和参考.
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