【摘 要】
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蛋白质检测方法层出不穷,如凝胶电泳,荧光共振能量转移,表面等离子共振等.但上述方法各自存在一些不足,有的对仪器要求较高,有的需要特殊标记.化学发光法是一种简单而有效的检测技术,将化学发光和应用于蛋白质检测,将大大提高检测灵敏度和检测效率.末端保护法,是基于末端带有小分子的单链DNA在与小分子对应的的特异性蛋白质相互作用后,DNA被保护起来,免于被外切酶I从末端降解。本工作中,以链霉亲和素为模板,建
【机 构】
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武汉大学化学与分子科学学院,生物医学分析化学教育部重点实验室,430072
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蛋白质检测方法层出不穷,如凝胶电泳,荧光共振能量转移,表面等离子共振等.但上述方法各自存在一些不足,有的对仪器要求较高,有的需要特殊标记.化学发光法是一种简单而有效的检测技术,将化学发光和应用于蛋白质检测,将大大提高检测灵敏度和检测效率.末端保护法,是基于末端带有小分子的单链DNA在与小分子对应的的特异性蛋白质相互作用后,DNA被保护起来,免于被外切酶I从末端降解。本工作中,以链霉亲和素为模板,建立了基于末端保护化学发光检测蛋白质的方法。链霉亲和素存在时,生物素修饰的单链DNA与之结合,外切酶I无法降解单链DNA,单链DNA与Hemin在含钾离子的缓冲中形成G四连体,催化化学发光,从而进行检测。该方法检测链霉亲和素的线性范围为8-25nmolmL-1,检测限为1.629nmolmL-1CS/N=6,该法操作简单,时间较短。
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