【摘 要】
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为建立猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因缺失疫苗和野毒感染的快速鉴别诊断方法,本研究根据猪伪狂犬病野毒感染的病毒具有gD表面抗原基因和gE毒力基因,而基因缺失疫苗只有gD基因未有g
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为建立猪伪狂犬病毒(PRV)gE基因缺失疫苗和野毒感染的快速鉴别诊断方法,本研究根据猪伪狂犬病野毒感染的病毒具有gD表面抗原基因和gE毒力基因,而基因缺失疫苗只有gD基因未有gE基因的特性,针对gD/gE基因的5′端核酸序列自行设计引物,建立鉴别猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗和野毒感染的二重PCR诊断方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;利用所建立的检测方法对临床疑似样品进行了检测。结果表明成功建立了鉴别猪伪狂犬病毒gE基因缺失疫苗和野毒感染的二重PCR诊断方法,该方法灵敏度高,最低检出限为100个拷贝/L;重复性好;特异性强,可特异性地扩增出PRV细胞毒中的gD和gE基因和gE基因缺失疫苗毒的gD基因,但对PK-15细胞和猪流行性腹泻等其他8种病原对照扩增不出任何条带;自1243份临床疑似PRV感染病料中共检测出PRVgD和gE基因双阳性样品即感染阳性样品567份,PRVgD基因单阳性样品28份。说明建立的二重PCR鉴别诊断方法快速、灵敏、特异,对于临床上疫苗毒和野毒感染的快速鉴别诊断具有重要意义。
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