狂犬病毒RT-PCR检测方法的建立

来源 :2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuwenwu321
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本实验先对国内各省市地区报导的狂犬病毒株序列进行比较,确定N基因上相对保守的区域,以兽用疫苗株HEP-Flury为阳性毒株,在其N基因的保守区域内设计引物,建立诊断狂犬病毒的RT-PCR方法。用此RT-PCR方法程序检测另四个狂犬病毒毒株:SN、SN10、G1N2、L16,结果均为阳性;检测犬细小病毒、犬瘟热病毒为阴性;该方法最低可检测到20ngHEP-Flury病毒的总RNA,或4×104个FFU。提取8只攻毒小鼠的海马回及延髓,用本方法与直接免疫荧光抗体试验分别进行检测,RT-PCR可检测到8个阳性,FAT可检测到6只小鼠的荧光斑点,说明用普通RT-PCR方法比直接免疫荧光染色法的敏感性更高。
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