气道平滑肌细胞内mRNA结合蛋白HuR对α-肌动蛋白表达的影响

来源 :2016中华医学会呼吸病学年会暨第十七次全国呼吸病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duoduo19851125
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  目的 HBSMC作为气道最主要的组成部分,PDGF在哮喘的发生发展中发挥着重要的作用.α-肌动蛋白是HBSMC的特征性标志物,其含量可以反映HBSMC的数量及其收缩能力的改变.HuR可与目的蛋白mRNA 3UTR 的AREs 结合,使mRNA翻译增加,下游蛋白表达量增加;本研究采用体外培养HBSMC的方法,应用PDGF刺激模拟哮喘的病理状态,观察HuR蛋白对HBSMC中α-SMA表达的影响.方法 1.应用免疫荧光,检测HuR在细胞核与细胞质的分布.2.应用Western blot和RT-PCR方法,检测各组HuR及α-SMA的蛋白、RNA水平.3.使用siRNA沉默HuR蛋白,研究PDGF对HBSMC中α-SMA表达的影响.结果 PDGF呈时间依懒性增强细胞内HuR及α-SMA的表达.siRNA特异沉默HuR后,α-SMA表达量也相应减弱.HuR沉默后,HBSMC中PDGF诱导的α-SMA的表达.PDGF可以刺激HuR从胞核向胞质的转位.而特异的HuR干扰RNA转染细胞能显著降低HuR的表达.结论 1.PDGF刺激可增加HBSMC中HuR及α-SMA的表达;2.HuR参与PDGF诱导的α-SMA表达过程.
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