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目的:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是目前尿上清microRNA(miRNA)最常用的检测方法,适宜的内参基因对获得可靠RTqPCR分析数据至关重要。本研究旨在对RT-qPCR 检测膀胱癌患者尿上清miRNA 的内参基因进行系统评估与验证,筛选最适宜内参基因。方法:收集3 例膀胱癌和3 例健康对照尿液上清,采用高通量Miseq 测序技术对两组样本进行测序,选择两组样本中表达无差异的miRNAs 作为候选内参基因;采用RT-qPCR 技术,在80 例膀胱癌和80 例健康对照尿液上清中对候选内参基因和常用内参基因U6snRNA 进行验证;利用geNorm 和NormFinder 两种运算法则评估内参基因的表达稳定性,进一步选择最适内参基因;在63 例膀胱癌和63 例健康对照尿液上清中对筛选出的最优内参基因进行进一步验证。