外泌体由细胞内的多泡小体(multivesicular bodies)与细胞膜融合后以外分泌的形式释放到细胞外,直径约为40nm-100nm,密度在1.13-1.21g/m1的小囊泡。外泌体通过其双层膜结构与细胞膜融合分泌到胞外,这些双层膜结构包括四跨膜蛋白tetraspanins(CD9,CD63,CD81,etc.)。外泌体广泛存在于细胞培养上清以及各种体液(血液、淋巴液、唾液、尿液、精液、乳汁)中,携带有细胞来源相关的多种蛋白质、脂类、DNA、m RNA、mi RNA等,参与细胞间通讯、细胞迁移、血管新生和免疫调节等过程。如今众多的研究热点中,外泌体在人体中的作用一直不断被挖掘出来,越来越多的疾病被发现与外泌体的作用相关。但因为外泌体为纳米级大小,研究手段众多,方法学一直存在一定的难度,且能统一细胞学、蛋白组学和基因组学的研究目前实属科学所需。BD就这一难题进行实践,希望为科研及临床应用开辟出一条新的方法学—Exosome FACS Solution,总结如下外泌体整体解决方案,从外泌体的提取,经流式细胞仪的鉴定和纯化,得到足够纯度和得率的外泌体,进一步进行蛋白和基因组学方面的重要结果。通过免疫磁珠法进行外泌体的提取,通过流式细胞术进行外泌体的鉴定和纯化,用CD9和CD63进行荧光染色,使用BD新一代全智能型流式分选仪FACSMelody进行分选纯化,纯度高达99.83%,分选纯化后的外泌体进行磁珠洗脱,后进行蛋白和基因检测,最终总蛋白含量高达6.8ug以上,并用PCR方法以GAPDH和ACTB作为内参,检测到外泌体特异性HSPA8和CD81的表达。综上,BD生命科学开发并提供了一套外泌体流式以及蛋白基因检测的整体解决方案,助力外泌体的研究,通向更高效地医学难题解决之路。