【摘 要】
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大豆组织培养是其遗传转化的主要技术构成之一,组织培养中最基本也最关键的要求是无菌。由于大豆转化的起始外植体为萌动1d的种子,此时被污染的种子尚无任何表现症状,而农杆菌侵染又是在液体中进行,一粒种子的污染可能导致整个实验的失败,因此,大豆种子的消毒在遗传转化中显得更为关键。国内外通用的方法将污染的器皿丢弃,然而在转化后期扔掉已长大的组培苗十分可惜。本研究对来自不同生态区的品种进行氯气消毒后发现,细菌
【机 构】
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中国农业科学院油料作物研究所,武汉 430062 The Oil Crops Research I
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大豆组织培养是其遗传转化的主要技术构成之一,组织培养中最基本也最关键的要求是无菌。由于大豆转化的起始外植体为萌动1d的种子,此时被污染的种子尚无任何表现症状,而农杆菌侵染又是在液体中进行,一粒种子的污染可能导致整个实验的失败,因此,大豆种子的消毒在遗传转化中显得更为关键。国内外通用的方法将污染的器皿丢弃,然而在转化后期扔掉已长大的组培苗十分可惜。本研究对来自不同生态区的品种进行氯气消毒后发现,细菌污染经氯气消毒后可以完全除去。主要污染源为真菌，主要种类为镰抱菌、拟茎点霉种腐菌和黑斑菌，这些病菌主要以菌丝形式均可随种子传播，其污染特点为病原初期生长缓慢，形成明显菌丝约需3~5d时间，2~3d后菌丝迅速菱延至整个培养器皿，抗生素对其无效，利用真菌在前期生长较慢的特点，大豆共培3~5d后，将外植体转入含有菌抑(组培专用真菌抑制剂)的培养基中进行抗性芽的诱导、伸长和生根，对真菌抑制效果达到99％以上，且不与baste、潮霉素等筛选剂发生拮抗作用，对个别污染的外植体挑出即可，不必丢弃整皿组培苗，有效提高了转化的效率。
其他文献
本研究以147个大豆品种为材料，采用温室苗期水培方法，观察各品种在低氮和正常供氮环境下叶片黄化程度，初步评价大豆品种苗期对低氮的反应。根据叶片黄化程度差异作初步筛选。通过对相关指标的变异系数进行比较并结合各指标相关性分析结果，将干重、地上部分氮积累量、生物量增加值和氮吸收量作为判断耐低氮的指标，最终筛选出耐低氮型品种坡黄和氮敏感型品种84-70。对这2个品种开展数字表达谱分析，首先进行低氮处理，对
发根农杆菌介导的大豆根系转化体系具效率高、周期短,操作简单等特点,可用于根系相关基因的功能验证。本研究利用发根农杆菌介导的转化体系,将TaNHX2基因导入大豆根系中,获得大豆“复合体”植株,并进行耐盐实验。结果表明,盐处理15d时,过表达TaNHX2基因的大豆“复合体”植株在浇171mMNaCl溶液的土壤中和高达200mMol/LNaCl的固体培养基上都有更高的耐盐性,而对照(非转基因)植株的叶片
许多微生物都具备抗草甘膦的特性。若将微生物中的抗草甘膦基因克隆后转入作物体内进行表达,就可以降低或避免草甘膦对作物的药害。国内外已有很多关于抗草甘膦菌株的分离研究报道,但这些菌株对草甘膦的抗性相对较低。本研究从生产草甘膦工厂排污口的污泥中筛选到一株抗草甘膦浓度高达600 mmol·L-1的真菌ND-1,并对其进行了形态学鉴定、生理生化特性测定及5.8S rDNA-ITS分子鉴定。结合形态学观察、生
大豆是一种高需氮作物,对氮素的利用直接影响到大豆的品质和产量。挖掘与克隆大豆在氮素胁迫条件下诱导高表达的基因的启动子,对于在转基因作物新品种中调控功能基因表达,有效发挥基因功能具有重要意义。以大豆品种中黄13为材料,利用大豆幼苗水培系统,分别进行了不同氮素水平下的全基因组表达谱芯片分析。根据氮胁迫下的基因表达变化水平,初步挑选了29个在根或叶中高水平表达且响应低氮胁迫的基因。利用实时定量PCR进一
由大豆疫霉菌引起的大豆疫霉根腐病是大豆生产上的毁灭性土传病害之一。研究大豆疫霉根腐病的抗病机制,是培育广谱、稳定、高效、持久抗病品种的基础。microRNA(miRNA)是真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码小分子RNA,通过碱基互补配对的方式识别靶标mRNA,并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶标mRNA或者抑制靶标mRNA的翻译。miRNA在植物生长发育和病害防御中起着重要的作
基因芯片技术是研究不同品种及处理间基因差异表达的有效手段，它既能直观反映出基因组中各基因间的相互关系，也能表现出不同条件下基因的转录调控水平，从而通过基因组转录效率来获得共同表达的基因信息，有助于筛选目的基因。本研究运用基因芯片技术对大豆质核互作雄性不育系NJCMS2A与其保持系NJCMS2B间差异表达基因进行研究，寻找大豆雄性不育相关基因，为利用基因工程方法创造大豆雄性不育新材料提供基础。
FtsH蛋白参与PSⅡ核心蛋白D1蛋白光氧化损伤的降解，是植物抵抗光抑制，修复PSⅡ正常功能的关键成分之一。本实验室前期从大豆科丰一号的15号染色体上克隆了GmftsH基因，本研究采用花粉管通道法和农杆菌介导子叶节转化法将GmftsH基因导入栽培大豆中，为培育转基因高光效大豆新品种提供基础。
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