【摘 要】
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目的 探讨微RNA(miRNA)-2l 在大肠癌细胞中的表达,抑制miRNA-21 (miR-21)表达对大肠癌细胞中PTEN 、PI3K 、Akt、MMP-9、mTOR 表达的影响及其可能调控的靶基因.方法 通过反义寡核苷酸(ASO)技术抑制大肠癌细胞株HCT116 中miR-21 的表达并加以验证.通过荧光定量PCR 技术及蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测HCT116 细胞中P
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院普外科,重庆医科大学附属第一医院重庆市普外科学重点实验室 重庆,400016
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目的 探讨微RNA(miRNA)-2l 在大肠癌细胞中的表达,抑制miRNA-21 (miR-21)表达对大肠癌细胞中PTEN 、PI3K 、Akt、MMP-9、mTOR 表达的影响及其可能调控的靶基因.方法 通过反义寡核苷酸(ASO)技术抑制大肠癌细胞株HCT116 中miR-21 的表达并加以验证.通过荧光定量PCR 技术及蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测HCT116 细胞中PTEN 、PI3K 、Akt、MMP-9、mTOR 基因表达的改变.利用生物信息学分析预测miRNA-21 可能的靶基因,荧光素酶双报告基因系统检测PTEN 活性.结果 miR-21 在HCT116 中表达最高,在SW480 中表达最低.miRNA-21 在细胞株HCT116 中的表达得到有效抑制,并且PTEN 基因及其蛋白的表达明显上调,PI3K 、Akt、MMP-9、mTOR 表达下调.筛选并确认了PTEN 为miR-21 的调控靶基因之一.结论 抑制miR-21 的表达可促进HCT116 细胞PTEN 表达升高,PI3K 、Akt、MMP-9、mTOR 表达下调,PTEN 可作为miR-21 的靶基因参与调控过程.miRNA-21 在大肠癌中表达失控,通过抑制PTEN 表达促进肿瘤细胞侵袭转移.
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