小分子淫羊藿苷Icariin调控软骨前体细胞ATDC5增殖和分化的机制研究

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jjq769015
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  目的:Icariin是中药淫羊藿的有效单体成分,能参与调控骨骼系统的发育过程;软骨前体细胞ATDC5具有向软骨诱导分化的潜能,在软骨组织工程的研究中扮演重要角色。本研究旨在探究Icariin对ATDC5增殖分化的影响并初步探讨相关机制。方法:分别用不同浓度Icariin在普通及ITS诱导分化条件下干预ATDC5细胞,用CCK8细胞活性实验检测细胞增殖情况,western blot实验检测细胞增殖、分化相关蛋白的表达;三维微球培养ATDC5细胞,甲苯胺蓝染色检测Icariin对ATDC5细胞诱导分化的影响;免疫荧光法检测ATDC5细胞骨架α微管蛋白(α-tubulin)的乙酰化及初始纤毛表达情况;通过使用Danusertib、Tubastatin A及小分子干扰RNA分别阻断Aurora A-HDAC6-IFT88信号轴的不同位点,检测在不同条件下Icariin对ATDC5细胞增殖、分化和初始纤毛表达的影响;分离培养小鼠原代软骨细胞,用RT-PCT和western blot实验检测Icariin干预下软骨增殖分化相关基因和蛋白的表达变化情况。
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