论文部分内容阅读
本文用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物间设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和护增条件,建立了DHBVcccDNA TaqMan荧光定量PCR方法.最低可检出104拷贝/ml;批内误差为0.2％～3.14％,批间误差为2.22％～4.43％;在103-1012拷贝/ml之间与Ct值具有很好的线性[Ct=-2.8361ln(x)+41.45,r=-09985].该法是一种灵敏度高、特异性强、较为简便的DHBVcccDNA定量检测技术.