猪Myostatin双正选择同源重组载体的构建

来源 :中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十三届学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenchenyaya
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文根据绵羊、猪、小鼠和牛的Myostatin基因序列,设计引物,通过PCR方法扩增了猪Myostatin基因的3臂、5臂,其长度分别为1.4Kb、4.4Kb.将扩增的片段与T载体连接后进行部分序列测定,与已知发表的Myostatin序列进行同源性比较,同源性为100%,对目的片段与载体进行酶切后定向连接形成转基因结构,经序列测定后,证明其插入方向和位置完全正确,构建了猪的Myostatin表达Neor、GFP基因的双正选择标记转基因载体.
其他文献
本试验根据已知牛染色体上CD18编码基因序列设计引物,提取牛血液和精液DNA,可扩增出338bp的DNA片段,将PCR产物克隆到pMD18-T载体中,对阳性重组质粒进行测序,确定为牛的CD18基因.由于CD18基因的383位碱基由A变为G,而引起牛白细胞黏附缺陷症(BLAD),通过对济南市11个奶牛场356头奶牛及53头荷斯坦种公牛进行了BLAD的PCR-RFLP检测,共检出3头杂合母牛(携带者)
为了建立牛精子蛋白的分离技术路线,本文对牛精子细胞裂解方法、双向电泳条件等进行了摸索,结果发现采用尿素-盐酸胍两步裂解法裂解精子细胞制备蛋白,并使用13cm非线性胶条进行蛋白二维电泳,能取得较好的实验结果.图谱经二维电泳软件分析,可检测出约800多个蛋白质点.对精子蛋白双向电泳条件的摸索,为后续牛精子特异性蛋白的检测和分析奠定了基础.
芬兰大体型蓝狐是芬兰科学家与养狐工作者经多年的精心培育而成,以其体型大,毛皮质量上乘而在世界裘皮行业中享有盛名,但引进到国内后纯繁的平均成活率较低,而胚胎移植技术是纯繁扩群的一种有效方法,同时也为狐的保种提供技术支持,本文探索了改良蓝狐之间进行胚胎移植的可行性.繁殖季节末期,采用6只自然发情芬兰改良蓝狐为供体,第一次配种后第10~11天进行手术法冲取胚胎,共获得59枚胚胎.将37枚可用胚通过手术法
由于乳腺组织结构及发育特点,其已经成为发育相关研究的理想模型之一。在乳腺发生、发育以及不同时期的增殖、衰退过程中,始终贯穿着乳腺干细胞的自我更新、增殖分化.本试验中乳腺原基中干细胞的定位、乳腺原基移植再生乳原以及乳腺发生、发育机制研究可以为人类乳腺疾病治疗、因疾病切除后的乳腺再生等临床应用和对家畜乳腺改造以生产某种珍贵蛋白、提高家畜哺乳能力和产奶量等提供新的思路和技术支持。
母牛分娩后,经过8-12小时仍不能排除胎衣,即为胎衣不下,多发生于流产之后和舍饲母牛,胎衣不下常发生子宫内膜炎而导致长期不育.本文论述了牛胎衣不下的病因、症状、诊断、治疗以及预防方法。
本文对广西大学的广西巴马小型猪场青年和断奶母猪与哺乳母猪的发情、配种和产仔情况进行跟踪调查研究,以了解其发情和产仔特性.研究表明:(1)巴马小型猪母猪初情期在120日龄(即4月龄)左右;(2)69%巴马小型猪哺乳母猪在哺乳仔猪期间可以表现正常发情、排卵,配种后也可以正常受胎产仔;(3)巴马小型猪哺乳母猪发情周期(21.1±2.2天)比青年和断奶母猪的(19.0±1.5天)长,差异极显著(p<0.0
为了更好地了解产后第一胎母牛在分娩后生殖系统机能的恢复及发情周期中卵巢形态、功能和卵泡发育波的动态变化,利用B-型超声波影像技术监测产后母牛的卵巢和黄体的发育规律,以期有效地在牛繁殖生产中控制母畜繁殖机理和卵巢的功能,缩短产间距,提高家畜的繁殖力.
本试验以广东温氏集团培育的黄羽肉鸡种蛋胚胎为研究对象,以与人和小鼠胚胎发育相关的胰岛素样生长因子2受体基因(IGF2R:Insulin-like growth factor type Ⅱ receptor)为候选基因,进行了SNP位点的筛选和多态性的检测;探讨了IGF2R基因的变异对胚胎死亡的影响.在IGF2R基因第34外显子中发现2个SNP位点,对具有AlwNI酶切位点的SNP位点进行了PCR-
为了探讨LIF对小鼠体外受精及早期胚胎发育的影响,本文分别进行了两个试验.试验Ⅰ:采用添加不同浓度LIF(Leukemiainhibitory factor,LIF)的HTF培养液对精子处理,统计其精子活力及受精率;试验Ⅱ:采用添加不同浓度LIF的mM16对体外受精获得的早期胚胎进行培养,观察胚胎的发育潜能并统计其囊胚发育率.结果,试验Ⅰ:添加LIF对精子活力没有明显的提高(P 0.05);LIF
本研究利用MAS合成代谢过程中的抑制剂AY9944累积FF-MAS,间接地研究了内源性MAS对猪卵母细胞体外成熟质量的影响.将采自猪卵巢表明直径3-5 mm卵泡的卵丘细胞包裹的卵母细胞(COCs,cumulus oocyte complexes)培养在NCSU23成熟培养液中,并添加不同剂量(5μM、10μM、20μM、40μM)的AY9944培养44 h.培养结束后,脱去卵丘细胞进行孤雌激活和以