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研究资料表明,人类癌症中最常见的基因改变是p53基因突变它是抗癌基因中最重要的一个成员,成为最引人注目的肿瘤抑制基因。p53基因调控细胞生长的功能以及肿瘤发生的密切关系使得其一直处于细胞学与肿瘤研究的“热”点位置。本实验通过将p53基因cDNA片段插入到大肠杆菌表达载体PET-32a中,得到重组表达质粒PET-32a-p53;用PET-32a-p53重组质粒转化大肠杆菌BL21,转化菌经EcoRI,HindⅢ双酶切和PCR扩增证实p53基因插入。IPTG诱导大肠杆菌表达P53蛋白,用SDS-PAGE分离鉴定,再通过Ni-NTA His-Band树脂亲和层析柱纯化得到纯的P53蛋白,并通过四唑氮盐比色法(MTT法)、集落形成等方法观察P53蛋白对K562细胞生长抑制以及对其生长周期的影响,应用流式细胞术、DNA ladder等方法检测K562细胞凋亡的发生。本文还通过将P53蛋白与已修饰氨基的磁性纳米粒子相连,用AFM观察了P53蛋白在肿瘤细胞中的定位,证实了纳米粒子作为药物载体应用于临床的可能性。实验证明,通过原核表达的P53蛋白具有较高的活性,在体外分析时发现P53蛋白能抑制K562细胞生长并促使其发生凋亡。本实验为寻找新型抗肿瘤基因工程药提供可靠的数据和资料。