检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luckyphilip
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选用猪肺炎支原体168株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。结果显示,ELISA试验的最佳反应条件:抗原包被浓度为1.5μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度为1:100,酶标抗体1:10000稀释;包被液为pH 9.6的碳酸盐缓冲液,2%明胶作封闭液,洗涤液为含0.5%PBST,稀释液为4%PEG6000-PBST;抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体最佳作用时间为60min.使用猪肺炎支原体168株作为包被抗原建立的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒具有较高的特异性、敏感性和较好的重复性。
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