开发快速灵敏、制备简单、成本低的荧光检测胰蛋白酶的方法具有重要的理论意义和应用价值。本研究采用聚环氧乙烷(PEO)对疏水染料芘进行亲水化修饰设计,以获得具有良好水溶性和荧光性能的两亲性探针分子PEO-py。以细胞色素C(Cytc)作为胰蛋白酶的水解底物以及淬灭剂。加入细胞色素C后,两亲性探针分子通过疏水作用吸附到细胞色素C上,荧光通过电子传递而淬灭。加入胰蛋白酶水解后,荧光强度进一步降低,建立了基于荧光强度降低的胰蛋白酶检测方法。对胰蛋白酶的检测限可达到0.156μg/mL,检测线性范围为4.5μg/mL到50μg/mL。其他蛋白不会引起荧光强度的降低,检测体系具有良好的选择性。通过亲水化修饰提高了芘衍生物的水溶性,建立了制备简单、成本低、水溶性好的检测探针,拓展了芘在生理环境中的检测应用。