益生嗜酸乳杆菌初步筛选及高密度发酵研究

来源 :第十七届益生菌与健康国际研讨会摘要集 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yueming1030
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嗜酸乳杆菌常作为益生菌菌种,具有增强机体免疫力、缓解乳糖不耐症、治疗腹泻和降胆固醇等功能,但优良益生特性和生产特性菌株比较匮乏。此外,生产和加工过程中由于受终产物抑制和发酵底物营养供给不足等因素的影响,导致菌株生长速度慢、菌体生物量低,限制了嗜酸乳杆菌的开发与利用。因此筛选优良益生特性的菌株,并进行高密度培养,获得高生物量、高活力的益生嗜酸乳杆菌菌株,对于益生菌的产业化应用和优良膳食补充剂新产品的开发具有重要研究意义和广阔的开发应用潜力。本文以8株嗜酸乳杆菌为研究对象,通过人工胃肠液耐受性和胆盐耐受性试验进行潜在益生菌株的筛选,结果表明,供试菌株中Lactobacillus acidophilus IMAU81186特性最好,在pH2.5的人工胃液(3h)中的存活率为85.76%,在pH为8.0的人工肠液中的存活率分别为85.77%(4 h)和33.69%(8 h)。IMAU81186的胆盐耐受能力也较强,胆盐延滞时间为0.39 h。因此选用该菌株进行后续试验,通过优化其静态培养条件、培养基成分和高密度发酵工艺,显著提高菌株的生物量。试验结果如下IMAU81186静态培养条件为:初始pH为6.5,温度为35℃,接种量3%。IMAU81186的优化培养基为:葡萄糖30.18 g/L,大豆蛋白胨37.35 g/L,鱼蛋白胨18.68g/L,柠檬酸钠2.46 g/L,乙酸钠6.125 g/L,K2HPO4 2.46 g/L,MgSO4·7H2O 0.4g/L,MnSO4·5H2O 0.04g/L,丝氨酸0.01 g/L,尿嘧啶0.3 g/L。优化后菌体活菌数达到(2.14±0.24)×10~9 CFU/mL,较优化之前的活菌数(7.82±0.28)×10~8 CFU/mL)提高了2.74倍。高密度发酵最佳条件为:恒pH为5.5,中和剂为20%的氨水。在5L全自动机械搅拌发酵罐中进行IMAU81186增殖培养,菌体生长速度明显增快,对数期延长,菌体密度也显著提高。最终菌体活菌数达到(5.5±0.43)×10~9 CFU/mL,较优化之前(7.82±0.28)×10~8 CFU/mL提高了7.03倍。
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