类caspase-3蛋白酶的纯化鉴定及其在木质部细胞分化中的功能

来源 :第十届全国植物结构与生殖生物学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:na2222222
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  木质部细胞分化是一个典型的细胞程序性死亡(PCD)过程.植物PCD与动物细胞凋亡过程具有很多相似之处.Caspases 蛋白酶是动物细胞凋亡的关键调节因子,尤其caspase-3 是最主要的执行者.尽管在植物基因组中没有发现动物caspases 的直系同源基因,但类caspase 蛋白酶活性参与了许多植物发育和PCD过程.然而,木质部细胞分化过程中是否具有caspase 活性参与、是什么蛋白负责了植物中的类caspase-3 活性仍不清楚.我们通过疏水层析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,从杨树木质部细胞中纯化得到了负责类caspase-3 活性的蛋白复合体.通过液相色谱串联质谱鉴定和序列分析发现,这个蛋白复合体是20S 蛋白酶体.杨树的20SP 由12 个基因编码的7 种α 类亚基以及12 个基因编码的7 种β 类亚基共同构成.在拟南芥VND6 诱导的管状分子(TEs)分化细胞培养系统和百日草TEs 分化细胞培养体系中,caspase-3 抑制剂和蛋白酶体抑制剂都能够抑制TEs 分化,表明具有caspase-3 活性的蛋白酶体参与木质部细胞分化的调控.
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