【摘 要】
：
目的：建立1种9号染色体杂合性缺失(LOH)的分析方法,以解释因ABO基因附近染色体的LOH导致的疾病相关ABO抗原丢失现象。方法：在9号染色体长臂和短臂上共选取13个微卫星位点,其中10个位点(D9S1677、D9S289、D9S1776、D9S1682、D9S290、D9S164、D9S1818、D9S1826、D9S158、D9S1838)位于ABO血型基因近端,平均间距5.52 cM；另3
【机 构】
：
Blood Center of Zhejiang Province;Key Laboratory of Blood Safety Research,Ministry of Health,Hangzho
论文部分内容阅读
目的：建立1种9号染色体杂合性缺失(LOH)的分析方法,以解释因ABO基因附近染色体的LOH导致的疾病相关ABO抗原丢失现象。方法：在9号染色体长臂和短臂上共选取13个微卫星位点,其中10个位点(D9S1677、D9S289、D9S1776、D9S1682、D9S290、D9S164、D9S1818、D9S1826、D9S158、D9S1838)位于ABO血型基因近端,平均间距5.52 cM；另3个位点(D9S1858、D95171、D9S1843)位于ABO基因远端,平均间距39.3 cM.分别设计合成FAM和HEX荧光标记引物,优化PCR扩增后,以聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳,通过GeneMapper软件分析微卫星不稳定性,观察染色体LOH发生情况。结果：13个微卫星位点均得到了较好的PCR扩增效果,PCR产物长度在75～273 bp之间,各位点均有较高的杂合度,适合于微卫星片段长度分析。13个位点可在2个泳道中进行双荧光同步分析,各位点不同等位基因间互不干扰。分别对1例正常血型标本和2例血液病相关的ABO抗原变异标本(包括口腔黏膜DNA和外周血DNA)进行微卫星分析,正常血型标本的口腔DNA和外周血DNA未发现染色体LOH现象。而2例ABO抗原变异标本,与口腔黏膜DNA相比,外周血DNA均存在不同程度的LOH现象,表明ABO抗原丢失可能源于血液系统疾病相关的9号染色体LOH现象。结论：建立了1种基于微卫星不稳定分析的9号染色体LOH方法,可用于血液系统疾病相关的ABO抗原丢失标本分子机制的研究。
其他文献
目的：回顾性调查长沙市无偿献血者中男男同性HIV感染情况及WB带型分析,为无偿献血宣传、招募、体检征询等方面采取有效措施提供参考依据。方法：收集长沙市2010年1月～2012年6月无偿献血者314551份血液标本及其人口流行病学资料,采用ELISA初筛检测,反应性标本用蛋白免疫印迹(WB)进行确认。结果：2010年1月～2012年6月共检出抗-HIV阳性献血者80例,其中30例为男男同性性行为感染
目的：评估酶联免疫法的窗口期HIV血样。方法：将酶联免疫法阴性标本采用六混样用2种试剂进行平行核酸检测，在检测出阳性标本后，亦用2种试剂对其拆分进行单管核酸检测。结果：10个月内共筛查16769例酶联免疫阴性标本中，核酸检测出1例HIV阳性标本，罗氏一代试剂由于该标本病毒载量浓度过高体现出抑制作用，罗氏二代试剂未显示出抑制作用。结论：目前现行开展的检测技术仍有安全隐患，为进一步保证临床用血的安全，
目的：观察人体红细胞膜CD35和血液中CIC在HBV感染时的变化,探讨红细胞在HBV感染过程中的作用.方法：选择HBV感染者102例,采用流式细胞仪检测红细胞膜CD35+-E(％)和CD35-GMFIR,采用C1q-ELISA法测定血清循环免疫复合物(CIC)含量,并以30例健康者作为对照组进行比较.结果：相比于对照组急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、重型乙型肝炎组红细胞膜表面CD35+-E(％)和CD
目的：本研究确定造血干细胞移植后血浆sHLA-G水平和单个核细胞(mononuclear cells)膜HLA-G表达与移植物抗宿主反应的关系.方法：225名首次造血干细胞移植患者依据移植物抗宿主反应的活性,分为急性移植物抗宿主反应组(acute GVHR)和慢性移植物抗宿主反应组(chronic GVHR),分别为96名和129名.健康献血者95名作为对照组.流式细胞法分析单核白细胞膜HLA-G
目的：依据常规检测结果与确认结果的符合率、有效拆分率(拆分阳性数占总混样阳性数的比率)、“假阳性”率(拆分阴性数占总混样数的比率)，对COBASs201核酸检测系统进行应用评价.方法：对酶免分析(EIA)阴性、核酸检测阳性献血者进行确认和随防，观察实验室常规检测结果与确认结果的符合率；计算试验的有效拆分率及“假阳性”率.结果：应用罗氏COBASs201系统，采用6混样(pool)检测，阳性pool
目的：采用新型Rh血型系统的MLPA检测试剂盒,对广州地区收集的200名RhD阴性献血者进行基因分型.方法：采用传统的血型血清学方法,对RhD阴性献血者进行RhD表型鉴定.提取基因组DNA,采用MLPA检测试剂盒对收集的200名RhD阴性献血者进行RHD基因分型.对于不能明确分型的标本,进行RHD基因直接测序分析.结果：在200名RhD阴性献血者中,采用MLPA方法对196名进行了明确的基因分型.
目的：通过在献血者中筛选稀有血型,获得针对高频血型抗原组表达阴性的稀有表型,解决临床稀有血型血液供应困难的难题.方法：在国家“十一·五”和“十二·五”计划项目中,通过国内13个省级血液中心的联合,利用血型血清学方法和分子生物学方法,我们开展了针对Duffy,Kell,Kidd,MNS,Gerbieh,Diego,Yt,Lutheran,Colton,Ok以及ABO,Rh血型系统中高频抗原的筛选.在
本文以新闻媒体的眼光、特征、目的阐述对无偿献血宣传工作的认识，并介绍了采供血机构如何定位媒体，如何与媒体建立长期友好关系，如何应对媒体对于突发事件的采访与报道等技巧和策略。
目的：确认HLA新等位基因HLA-B*56∶21并分析其有异常反应格局的核苷酸序列。方法：标本DNA抽提采用美国Tiangen试剂盒,采用聚合酶链反应序列-特异寡核苷酸探针杂交技术(PCR-SSOP)进行HLA分型,发现1个与HLA-B*56相关的异常基因,使用DNA测序分型技术(PCR-SBT)直接测定其基因序列,并分析其与最接近的HLA-B*56∶05∶02和HLA-B*56∶07基因序列的差
目的：分析2011年度上海市血液中心发放的全国血型血清学室间质控品返回的回执结果.方法：采用国际血型参比实验室(iBGRL)建立的国际血型血清学室间评分标准,对参评的74家血站及医院输血科血型实验室的回执进行评分,计算各项试验的准确率,并通过Z检验(标准统计量检验法)进行满意度统计.结果：全国血站血型室及部分医院输血科的ABO定型准确率为99.76％,RhD定型准确率为100％,抗体筛选准确率为9