【摘 要】
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目的：DNA条形码技术结合UFLC分析技术开展藏药翼首草品质评价研究.方法：采用试剂盒法提取样品DNA,PCR扩增其ITS2序列并双向测序,所得序列经过CodonCode Aligner拼接,软件ME
【机 构】
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成都中医药大学,四川成都,610075
【出 处】
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成都中医药大学2014年度研究生论坛
论文部分内容阅读
目的：DNA条形码技术结合UFLC分析技术开展藏药翼首草品质评价研究.方法：采用试剂盒法提取样品DNA,PCR扩增其ITS2序列并双向测序,所得序列经过CodonCode Aligner拼接,软件MEGAS.1进行数据分析.采用Agilent Proshell 120 SB-C18(4.6 mm 100 mm,2.7μn)色谱柱,乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长237nm,柱温30℃.测定翼首草中多个成分含量及指纹图谱.结果：翼首草样本的实验序列与查询序列的相似度达99％,说明实验药材样本来源准确.ITS2序列长度为232 bp,共获得6个单倍型及各单倍型间的变异位点.ITS2种内K2P距离为0～0.04003,种内平均K2P距离为0.0038.NJ树表现出良好的单系性.测定了21批次翼首草中绿原酸、马钱苷、獐牙菜苷、吴茱萸苷、大花双参苷A的含量,分别在一定浓度范围内线性关系良好；平均加样回收率在98.89.1～100.14％范围；结论：本试验建立DNA条形码技术结合UFLC分析技术开展藏药翼首草品质评价研究方法,为研究藏药真伪及优劣提供了一种新思路,为藏药质量控制奠定基础.
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