目的：观察密码子优化的沙眼衣原体(CT)外膜蛋白(MOMP)多表位基因的重组质粒,以及DNA初始免疫-蛋白加强免疫方式诱导小鼠的免疫应答水平，探讨提高CT-MOMP多表位DNA疫苗免疫原性的途径。 方法：采用生物软件和网络数据分别预测CT-MOMP CTL、B、Th表位，将多表位基因串连后按真核表达系统偏爱密码子优化，人工合成获得该多表位基因,并克隆至pcDNA3.1载体，同时进行多表位的原核表达，制备纯化的融合蛋白。分别设置四组小鼠，即重组质粒＋融合蛋白组、重组质粒组、载体组和NS对照组。采用priming-boosting策略，并选择0、20、40天的免疫程序，先将重组质粒(pcDNA3.1/CT-MOMP 多表位)DNA以100μg/只的剂量肌肉注射免疫BALB/c小鼠，于第20天同剂量再免疫1次后，于第40天再用100μg/只剂量的多表位蛋白加强免疫；其余DNA免疫对照组均选择100μg/只的剂量，同剂量进行加强免疫。于每次免疫后第10天每组处死4只小鼠，分别取血清和脾细胞检测其产生的体液免疫效应和细胞免疫效应。分别采用ELISA、LDH、CCK-8和流式细胞仪方法检测小鼠的特异性IgG抗体滴度、CTL活性、特异性淋巴细胞增殖水平及脾细胞胞内细胞因子浓度。 结果：末次免疫后重组质粒＋融合蛋白组、重组质粒组、载体组和NS对照组产生的IgG抗体的OD值分别为2.72±0.23、2.06±0.21、0.03±0.01、0.01±0.01，且抗体浓度随着免疫时间和次数的增加而增强；CTL活性分别为80.0±2.5％、64.6±2.3％、26.0±1.8％和20.0±1.1％；特异性淋巴细胞增殖水平(SI)分别为3.42、2.35、1.39、1.36；小鼠脾细胞胞内细胞因子IFN-γ分别为：1.3％、0.7％、0.2％和0.1％。所有结果显示DNA初始免疫-蛋白加强免疫组较其他对照组免疫效应有显著性差异。 结论：采用密码子优化和DNA初始免疫-蛋白加强免疫策略可提高CT-MOMP多表位基因重组质粒在小鼠中的免疫应答水平。