食管癌组织中ZIP5基因的表达以及稳定低表达ZIP5基因食管癌细胞系的构建

来源 :第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tdcdc
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本文研究在食管癌组织、癌旁组织、正常组织中ZIP5基因的表达情况,探索ZIP5基因在食管癌发展中可能的作用同时构建ZIP5基因稳定低表达的食管癌细胞系,为后续细胞水平实验和动物实验提供理论和实验基础.全面研究ZIP5基因在食管癌发生发展中的作用及机制,为食管癌的预防及靶向治疗提供新的理论基础.临床采集食管癌患者手术切除标本30例,利用免疫组化、Western Blot实验检测ZIP5蛋白在食管癌组织、癌旁组织与正常组织中的表达差异;用实时荧光定量PCR法从mRNA水平检测ZIP5基因在食管癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达差异。选择有特异沉默ZIP5基因效果的siRNA序列,分子克隆携带特异序列的质粒,将其克隆入慢病毒载体质粒PSD31,包装病毒,感染食管癌细胞系KYSE170,得到稳定低表达ZIP5基因的细胞系,并用实时荧光定量PCR和Western Blot来验证其沉默效果。研究表明,ZIP5基因在食管癌组织、癌旁组织、正常组织中表达强度明显由强到弱。ZIP5基因稳定低表达的细胞系成功建立。
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