【摘 要】
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本文采用异源模式筛选对硫磷杂交瘤细胞,以获得有机磷农药宽谱单克隆抗体.以PA0204-BSA免疫小鼠,首先用PA0204-OVA和PA0304-OVA作为同源和异源间接ELISA筛选出24个强阳性细胞
【机 构】
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浙江大学农药与环境毒理研究所中国林业科学研究院亚热带林业研究所
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本文采用异源模式筛选对硫磷杂交瘤细胞,以获得有机磷农药宽谱单克隆抗体.以PA0204-BSA免疫小鼠,首先用PA0204-OVA和PA0304-OVA作为同源和异源间接ELISA筛选出24个强阳性细胞,并测出对硫磷抑制中浓度IC50;从中选择抑制较好的10个细胞株,PA0203-OVA、PA0204-OVA、PA0304-OVA、PA0314-OVA及PA0318-OVA五种包被原下测定对硫磷及类似物的抑制情况,获得识别谱较广的2G6和7B2两个细胞株.经克隆、建株、腹水制备及纯化后,采用间接竞争ELISA法测定单克隆抗体的灵敏度和特异性.结果表明,2G6单抗在PA0314-OVA做包被原的条件下,与对硫磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷的抑制中浓度IC50为14.1、19.6、21.7ng/mL;7B2单抗在PA0304-OVA做包被原的条件下,与对硫磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷的亲和力差异较大,抑制中浓度IC50分别为35.3、12.1、8.1ng/mL.获得的这两株宽谱抗体可用于对硫磷、甲基对硫磷及杀螟硫磷的快速定性及半定量检测。
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