基于真核表达的F1抗原的间接免疫荧光法检测鼠疫杆菌F1抗体的实验研究

来源 :第二届全国人畜共患病学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lzfx_521
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目的:构建鼠疫杆菌F1抗原结构基因caf1的重组载体pcDNA3.1-hisB-caf1,在NIH3T3细胞中稳定表达,并用表达F1抗原的细胞株作为诊断抗原,探讨间接免疫荧光法(IFA)检测鼠血清中鼠疫杆菌F1抗体的可行性。 方法:将caf1基因克隆到质粒pCDNA3.1-hisB的多克隆位点上,构建重组载体pcDNA3.1-hisB-caf1,重组载体经脂质体转染至NIH3T3细胞中,G418筛选获得抗性细胞株,并以此细胞株为诊断抗原,IFA检测鼠血清中的F1抗体。 结果:经IFA证实,pcDNA3.1-hisB-Caf1能在NIH3T3细胞中稳定表达,并能与1例经ELISA检测为F1抗体阳性的鼠血清发生特异性反应。 结论:NIH3T3细胞稳定表达的F1抗原可作为IFA中的候选抗原,检测鼠血清中的F1抗体。
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