人脂肪干细胞分离培养鉴定及多向分化潜能的实验研究

来源 :2013年全军烧伤外科学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seracn
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  目的 探讨在不同诱导条件下人脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ASCs)的体外多向分化情况.方法 取人脂肪组织,用酶消化法分离、培养ADSCs,用免疫细胞化学法鉴定ADSCs.体外培养并测定第二、五、七代细胞增殖速率,绘制细胞生长曲线,计算群体倍增时间.流式细胞仪检测抗原CD44、CD49d、CD34,分析酶消化法获得的细胞分别向表皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞定向诱导的能力,明确其分化能力.结果 第二、五、七代细胞生长稳定,群体倍增时间约60 h.10代以内的脂肪干细胞随着传代次数的增加其增殖能力未现明显降低的趋势.免疫细胞化学显示,干细胞相关抗原CD44、CD49d为阳性,但与造血系统相关抗原CD34阴性.成表皮诱导组示:免疫组织化学鉴定结构显示有CK19的表达.成骨诱导组示:细胞碱性磷酸酶染色阳性.成脂肪细胞诱导组示:油红0染色,胞质内脂滴均被染成红色,证实为脂性液体.结论 脂肪干细胞体外增殖能力强,来源充足,细胞获得方便,又避免了伦理问题且具有向其他多种细胞分化的潜能,可能成为理想的组织工程种子细胞.
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