猕猴肉瘤病毒SV40 T-ag-C基因克隆及序列分析

来源 :第十届中国实验动物科学年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ooo2005net
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  目的 对来源于一株自然感染猕猴肉瘤病毒SV40病毒的猴肾细胞培养物进行大T抗原C-羧基端(T-ag-C)基因克隆及核苷酸序列分析.方法 采用PCR法分别从一株自然感染SV40病毒的猴肾细胞培养物、SV40 776标准株接种的vero细胞培养物提取的总DNA中扩增出451bp的SV40大T抗原C-羧基端(T-ag-C)基因片段,分别将其克隆到PMD 18-T载体中,转化至JM109感受态大肠杆菌细胞后,挑取阳性克隆进行测序鉴定,并对获得的目的基因核苷酸序列进行序列分析及同源性分析.结果 分析结果表明来源于猴肾细胞培养物的SV40大T抗原片段与本实验室来源于云南野生猴群的猕猴外周血所的所得到的SV40大T抗原片段(见另文报道)同源性为97.31%,与gene bank中登录号为NC 001669.1序列进行比对,同源性分别为96.33%,与SV40 776标准株接种的vero细胞培养物所扩增的大T抗原片段同源性为97.55%.结论 对大T抗原基因克隆和序列分析是了解和掌握SV40病毒分子流行病学及其变异趋势的重要手段.
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