【摘 要】
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目的:研究冬凌草甲素稳定维甲酸受体的具体机制,探究ROS和NF-kB信号通路在维甲酸受体稳定性和细胞分化中的作用.方法:Western blot的方法检测冬凌草甲素在APL细胞系NB4和原代白血病细胞中对维甲酸受体蛋白的影响;实时荧光定量PCR方法检测mRNA水平的变化.染色质免疫沉淀检测维甲酸受体蛋白质的DNA结合能力的变化;流式细胞仪检测细胞内ROS的变化;RNA干扰技术敲除细胞内的p65;细
【机 构】
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常州市第一人民医院,213003 上海交通大学附属瑞金医院,200025
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目的:研究冬凌草甲素稳定维甲酸受体的具体机制,探究ROS和NF-kB信号通路在维甲酸受体稳定性和细胞分化中的作用.方法:Western blot的方法检测冬凌草甲素在APL细胞系NB4和原代白血病细胞中对维甲酸受体蛋白的影响;实时荧光定量PCR方法检测mRNA水平的变化.染色质免疫沉淀检测维甲酸受体蛋白质的DNA结合能力的变化;流式细胞仪检测细胞内ROS的变化;RNA干扰技术敲除细胞内的p65;细胞免疫荧光检测p65的细胞内定位.结果:1)冬凌草甲素在APL细胞系和原代白血病细胞中,从转录后水平,明显地上调维甲酸受体的蛋白水平.并且冬凌草甲素所稳定的RARa蛋白可以增强ATRA的转录激活能力.
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